引物溶解稀釋的方法
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發(fā)布時(shí)間:2016-09-14
干粉引物溶解稀釋方法:
收到引物后,在開(kāi)啟離心管蓋前在3000-4000轉/分鐘的轉速下離心1分鐘,以防開(kāi)蓋時(shí)引物干粉散失。引物保存在高濃度的狀況下比較穩定。如果對實(shí)驗的重復性要求較高,合成的OD數較大,建議分裝,避免反復凍融。引物一般配制成10-100pmol/ul(umol/l)。
中洪博元的引物在出廠(chǎng)時(shí)都標有1OD 相當于多少u(mài)mol 的計算結果,進(jìn)行稀釋時(shí)的引物加水量可以按以下公式計算:
稀釋成100pmol/ul 1OD 需加水量(ul)=1OD相當于umol 數×10000
例如,您拿到的引物DNA合成報告單上標有1OD≈0.0035umol ,包裝量是1OD/管,如果您希望將引物濃度定為100umol/L,那么只需用35ul無(wú)核酸酶的雙蒸水將1OD的引物干粉溶解即可。
液體引物再稀釋可用下列公式:
稀釋引物要達到的濃度(pmol/ul)=母液濃度(pmol/ul)×汲取母液的體積(ul)÷(汲取母液的體積(ul)+加水量(ul))