?  熒光染色后一般在1h內完成觀(guān)察，或于4℃保存4h，時(shí)間過(guò)長(cháng) ，會(huì )使熒光減弱。

?  每次試驗時(shí) ，需設置以下三種對照：

–  陽(yáng)性對照：陽(yáng)性血清+熒光標記物

–  陰性對照：陰性血清+熒光標記物

–  熒光標記物對照：PBS+熒光標記物

?  標本片需在操作的各個(gè)步驟中，始終保持濕潤，避免干燥。

?  一抗和二抗應始終保持在標本片上，避免因放置不平使液體流失，從而造成非特異性熒光染色。