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免疫組化技術(shù)簡(jiǎn)單介紹

      免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)是應用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過(guò)化學(xué)反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來(lái)確定組織細胞內抗原((多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究的一種方法。

     眾所周知,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái),以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實(shí)驗動(dòng)物,制備特異性抗體,再用這種抗體(第一抗體)作為抗原去免疫動(dòng)物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過(guò)氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結合,將抗原放大,由于抗體與抗原結合后形成的免疫復合物是無(wú)色的,因此,還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應部位顯示出來(lái)(常用顯色劑DAB顯示為棕黃色顆粒)。通過(guò)抗原抗體反應及呈色反應,顯示細胞或組織中的化學(xué)成分,在顯微鏡下可清晰看見(jiàn)細胞內發(fā)生的抗原抗體反應產(chǎn)物,從而能夠在細胞或組織原位確定某些化學(xué)成分的分布、含量。組織或細胞中凡是能作抗原或半抗原的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、激素、核酸及病原體等都可用相應的特異性抗體進(jìn)行檢測。

      免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標記物的類(lèi)可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自影法等。

      用于病理診斷的主要有免疫熒光法和免疫酶法。免疫熒光法是現代生物學(xué)和醫學(xué)中廣泛應用的方法之一,包括熒光抗體和熒光抗原技術(shù),具有抗原抗體反應的特異性,染色技術(shù)的快速性,在細胞或組織上定位的準確性,以及熒光效應的靈敏性等優(yōu)勢。但是,由于免疫熒光法必須具有熒光顯微鏡,熒光強度隨時(shí)間的延長(cháng)而逐漸消退,結果不易長(cháng)期保存等缺點(diǎn),在普及應用上受到一定限制,而逐漸被免疫酶法所取代。


      (本文轉載丁香通)



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