一、原理:
免疫共沉淀(Co-IP)是以研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法,其原理基礎為抗體-抗原之間的專(zhuān)一性作用。在分子病理生物學(xué)研究領(lǐng)域,Co-IP是用以確定兩種蛋白在完整細胞內生理性相互作用的常用方法。其技術(shù)原理為:當細胞在非變性條件下被裂解時(shí),完整細胞內存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來(lái),如果用蛋白質(zhì)N的抗體免疫沉淀N,那么與N在體內結合的蛋白質(zhì)M也能沉淀下來(lái)。目前多用于精制的蛋白A預先結合固化在瓊脂糖的珠子(Beads)上,使之與含有抗原的溶液及抗體反應后,beads上的蛋白A就能吸附抗原到精制的目的。Co-IP主要用于測定兩種目標蛋白質(zhì)在體內的結合情況,也用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的結合蛋白。