菌種種類(lèi)如此繁多，必須使用菌種代號，要是將菌種弄混了就不好了，不是嘛？另外，保藏的過(guò)程中也會(huì )遇到各種各樣的問(wèn)題，你需要怎樣解決呢？本篇文章提供了菌種保藏的方法，供參考呦！

菌種代號的意義

菌種的復蘇與保存

菌種的復蘇與保存應在專(zhuān)用超凈工作臺或生物安全柜內進(jìn)行：
1.菌種的復蘇
       把凍干菌種管、滅菌1mL滴管、雙碟、鑷子、營(yíng)養肉湯培養基、營(yíng)養瓊脂斜面數支，移入超凈工作臺或生物安全柜。
       先用砂輪將凍干菌種安瓶頸部挫出刻痕，再將凍干菌種管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干，用75%乙醇棉擦凈，放在滅菌雙碟內，待干。點(diǎn)燃酒精燈，將菌種管的封口一端在火焰上，燒灼紅熱，用滅菌滴管吸取營(yíng)養肉湯培養基，滴在灼熱的菌種管封口一端，使驟冷而炸裂。
       取滅菌鑷子，在火焰旁，將炸裂的管口打開(kāi)，放入滅菌雙碟內，另取1支滅菌滴管，在火焰旁吸取營(yíng)養肉湯少許，加至菌種管底部，將凍干菌攪動(dòng)促使溶解，隨即吸出管內菌液，分別接種至營(yíng)養瓊脂斜面及普通肉湯內，并將滴管及菌種管投入消毒液內，將已接種的營(yíng)養肉湯及營(yíng)養瓊脂斜面置35~37℃培養22~24h。
       取出培養物，仔細觀(guān)察菌苔形態(tài)、有無(wú)雜菌、涂片、革蘭氏染色鏡檢，呈典型菌落后，轉種3代即可應用。如發(fā)現菌型不典型，可進(jìn)行平板分離單菌落。
 
2.菌種的傳代與保存
方法1：菌斜面（保存）
       培養基應新鮮制備，如斜面已無(wú)冷凝水者，不宜再使用。標簽上注明菌名及接種日期。
       至冰箱取出的菌種斜面，應在室溫放置約30分鐘，待溫度平衡后再移入接種室或超凈工作臺。
       點(diǎn)燃酒精燈，用左手握住菌種斜面，將管口靠進(jìn)火焰旁，右手拿接種棒后端，將接種環(huán)燒紅30秒，隨后將全部接種棒金屬部分在火焰上燒灼，往返通過(guò)3次。左手將管口在火焰上旋轉燒灼，右手用無(wú)名指、小指及掌部夾住棉塞，撥開(kāi)棉塞，將接種環(huán)伸人管內先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷卻再移至菌苔上，刮去少量菌苔，隨即取出接種棒，并將菌種管口移至火焰旁。
       堵上棉塞，左手將菌種管放下，取營(yíng)養瓊脂斜面1支，照上述操作打開(kāi)棉塞，將接種環(huán)伸入管內至瓊脂斜面的低部，由底向上，將接種環(huán)輕貼斜面的表面曲折移動(dòng)，使細菌劃在斜面的表面上。
       取出接種棒，在火焰旁將培養基管棉塞堵上，然后將接種過(guò)細菌的接種棒在火焰上燒灼滅菌。
       將已接種畢的細菌管置35~37℃培養22~24小時(shí)，霉菌管一般置20~25℃霉菌培養箱內培養7日。取出后放人冰箱保存，一般 3個(gè)月轉種一次。
 
方法2：菌斜面-營(yíng)養肉湯-分離平板-菌斜面
       如果菌落形態(tài)不典型可純化，按下列方法傳代（分離菌落）：用接種環(huán)取上述菌管（斜面）菌苔少許接種置營(yíng)養肉湯中(5mL/支，已滅菌)，置35~37℃培養18~24小時(shí)后，再用接種環(huán)取培養好的營(yíng)養肉湯菌懸液（濃菌液），接種于分離平板，置35~37℃培養18~24小時(shí)，用接種針選典型菌落劃線(xiàn)于營(yíng)養瓊脂斜面，置35~37℃培養18~24小時(shí)。一般同時(shí)接種幾支管，其中一支用于以后菌種傳代或接種到半固體瓊脂培養基中，其它用做工作菌種。

常用分離平板：
       大腸埃希菌——EMB瓊脂平板；
       銅綠假單胞菌——溴化十六烷三甲銨瓊脂培養基；
       金黃色葡萄球菌——甘露醇氯化鈉瓊脂培養基。
 
3.菌懸液的制備
       取上述培養好的菌種斜面移入超凈工作臺或生物安全柜，放置室溫后，用接種環(huán)取菌苔少許接種置營(yíng)養肉湯中(5mL/支，已滅菌), 將已接種畢的細菌管置35~37℃培養18~24小時(shí)，取出備用。
一般于冰箱中保存可用7天。
 
4.對照用菌液制備
       取上述培養好的營(yíng)養肉湯菌懸液（濃菌液1mL，加到9mL，0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液混勻，為10-1，再取另一只吸管吸取10-1菌液1mL加到9mL，0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液混勻，為10-2……
以此類(lèi)推，稀釋至含活菌數在50 ~ 100個(gè)。用平板計數。
       此稀釋菌液用于試驗后加陽(yáng)性對照，可在1天內使用。
 
5.菌種保管
       菌種保管應有專(zhuān)人負責，保存與加鎖的冰箱中或特制的白鐵箱中加鎖置陰暗處，確保菌種安全。因工作變動(dòng)時(shí)，必須做好交接工作。菌種應有詳細登記本，包括名稱(chēng)、分離日期、鑒定日期、鑒定者、主要鑒定性能，并注意記錄使用、轉移及銷(xiāo)毀情況和原因。各種菌種應按規定時(shí)間定期移種。一般每移種3次后作一次全面鑒定。注意菌種有無(wú)污染和變異，如，發(fā)現污染和變異時(shí)，應及時(shí)更換。購置菌種，應有介紹信。全部保存菌種應具備清單，并定期向部門(mén)負責人報告。

小結
 
       菌種保藏方法種類(lèi)繁多，如何在眾多方法中挑選出最適合自己的？小析姐也不好說(shuō)啦！這還得因實(shí)驗而異！