目的 研究miR-186通過(guò)負調控Smad6對人膠質(zhì)瘤細胞遷移和上皮間質(zhì)轉化的影響。

　　方法 qRT- PCR檢測星形膠質(zhì)細胞及膠質(zhì)瘤細胞中miR-186和Smad6的表達,Western blot檢測Smad6蛋白的表達水平;細胞分四組:空白對照組(U251)、模擬物組(miR-186 mimics)、質(zhì)粒組(pc-Smad6)、共轉染組(miR-186 mimics + pc- Smad6)。 Western blot檢測各組細胞Smad6、上皮間質(zhì)轉化相關(guān)蛋白E-cadherin和Vimentin的表達水平;劃痕實(shí)驗檢測各組細胞的遷移情況。

　　結果 與正常星形膠質(zhì)細胞比,人膠質(zhì)瘤細胞系U251中miR-186表達明顯降低,而Smad6表達明顯升高(P<0.05)。 較對照組,Smad6蛋白在miR-186 mimics組細胞中的表達顯著(zhù)下降,而在pc- Smad6組細胞中的表達則明顯增加(P<0.05);miR-186 mimics組細胞遷移能力顯著(zhù)降低,而pc-Smad6組明顯增強 (P<0.05);miR-186 mimics組E-cadherin蛋白的表達顯著(zhù)升高,而Vimentin蛋白表達明顯降低(P<0.05),在pc- Smad6組中兩種分子的表達情況相反(P<0.05)。 對比pc-Smad6組,miR-186 mimics + pc-Smad6組Smad6蛋白的表達水平明顯降低(P<0.05);miR-186 mimics + pc-Smad6組細胞的遷移能力明顯降低(P<0.05);miR-186 mimics + pc-Smad6組Vimentin表達明顯降低,而E-cadherin的表達顯著(zhù)升高( P<0.05)。

　　結論 miR-186可通過(guò)調控Smad6的表達而抑制人膠質(zhì)瘤細胞遷移和上皮間質(zhì)轉化。