目的: 觀(guān)察Pin1在皮膚中的表達情況,構建Pin1在皮膚中可誘導表達的轉基因小鼠模型。
方法: 將小鼠Pin1基因克隆到改造過(guò)的可與Myc標簽蛋白融合的pTRE2載體中,并將線(xiàn)性化的DNA通過(guò)顯微注射的方式構建TRE-Pin1小鼠。
結果: 成功獲得TRE-Pin1轉基因首建鼠,該小鼠與上皮特異的K14-rtTA轉基因小鼠配繁,獲得Pin1在皮膚上皮特異性可誘導表達的雙轉基因鼠;通過(guò)將多西霉素(又名強力霉素,Doxycycline)加入飲水的方式誘導Pin1基因的表達,并通過(guò)Western blot,免疫組織化學(xué)等方式證明了Pin1蛋白在皮膚上皮中能特異性地過(guò)表達。我們還發(fā)現內源的Pin1在皮膚中主要表達于上皮細胞。
結論: 成功構建了Pin1在皮膚中可誘導表達的轉基因小鼠模型,為后續研究Pin1在皮膚中的功能奠定基礎。