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小鼠循環(huán)肝癌細胞模型的建立與評價(jià)

  目的: 采用小鼠肝癌Hepa 1-6細胞建立小鼠肝癌循環(huán)腫瘤細胞模型。

  方法: 采用雄性C57BL/6小鼠108只,按照體重分為3組,每組36只。3個(gè)組分別每只尾靜脈接種0.2 mL的濃度為1×106、5×106和1×107個(gè)/mL的小鼠肝癌Hepa 1-6細胞單細胞懸液。各組分別于接種后第1、5、9、13、17、21天檢測采血,采用流式細胞術(shù)檢測,計算2萬(wàn)個(gè)有核細胞中CTCs數目及比例、相對CTCs抑制率,記錄動(dòng)物死亡率。②采用雄性C57BL/6小鼠80只,按體重分為2組,分別為模型對照組、甲苯磺酸索拉菲尼組,每組40只。每只尾靜脈接種0.2 mL的濃度為5×106個(gè)/mL的Hepa 1-6細胞單細胞懸液,接種后第2天開(kāi)始灌胃給予甲苯磺酸索拉菲尼(50 mg/kg),連續21 d,并于給藥第3、8、15、21天采血進(jìn)行CTC檢測。

  結果: ①接種濃度為1×106個(gè)/mL的細胞懸液后,第1、5、9、13、17、21天的動(dòng)物CTCs比例為:25.1%、18.1%、8.9%、4.4%、2.9%、0.3%,未出現動(dòng)物死亡;接種濃度為5×106個(gè)/mL的細胞懸液后,第1、5、9、13、17、21天的動(dòng)物CTCs比例為:40.4%、35.4%、15.4%、9.0%、6.6%、4.1%,未出現動(dòng)物死亡;接種濃度為1×107個(gè)/mL的細胞懸液后,第1、5天的動(dòng)物CTCs比例為:39.1%、33.5%,在接種完畢之后立即出現動(dòng)物死亡,且所有動(dòng)物在接種后第7天全部死亡。②甲苯磺酸索拉菲尼給藥期間D3、D8、D15、D21相對循環(huán)腫瘤細胞清除率分別為:-7.5%、4.6%、55.3%、-94.5%,與模型對照組比較差異有顯著(zhù)性(P<0.05或P<0.01)。

  結論: 采用濃度為5×106個(gè)/mL小鼠肝癌細胞Hepa 1-6懸液尾靜脈注射可建立小鼠肝癌CTC模型,可用于抑制循環(huán)腫瘤細胞藥物的篩選與評價(jià)。

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