目的:探討血管緊張素轉換酶2(Angiotensin-converting enzyme 2, ACE2)過(guò)表達對血管緊張素Ⅱ(Angiotensin II, AngⅡ)誘導的肝細胞白蛋白表達下調及細胞遷移性增強的抑制作用。
方法:常規培養大鼠肝細胞系BRL-3A細胞株,予以Ang II(10-7 mol/L)進(jìn)行刺激,觀(guān)察不同處理時(shí)間(24、48 h)組肝細胞內白蛋白、波形蛋白(vimentin)表達及細胞遷移性的改變;通過(guò)構建lentiACE2慢病毒載體,建立穩定過(guò)表達ACE2的細胞系,并分別用AngⅡ、A779進(jìn)行干預,觀(guān)察肝細胞內相應蛋白表達及其遷移性的改變。采用細胞免疫熒光、Western blot檢測細胞中蛋白水平變化;Transwell遷移實(shí)驗觀(guān)察不同處理組細胞遷移能力的改變。
結果:AngⅡ處理組肝細胞內vimentin表達顯著(zhù)增加、albumin表達減低,細胞遷移能力顯著(zhù)增強,并具有時(shí)間依賴(lài)效應。ACE2 過(guò)表達大鼠肝細胞albumin 表達明顯升高,vimentin 蛋白表達下降,該作用被MAS受體抑制劑A779 阻斷。同時(shí)ACE2過(guò)表達顯著(zhù)抑制AngⅡ的作用,vimentin合成顯著(zhù)下降,albumin表達水平顯著(zhù)升高,細胞遷移能力受到抑制。
結論:ACE2過(guò)表達可抑制AngⅡ誘導的肝細胞albumin表達下調及遷移能力增強。