目的  建立能對實(shí)驗動(dòng)物常見(jiàn)支原體進(jìn)行檢測的熒光定量PCR方法。

　　方法  針對多種大、小鼠易感支原體的16 s rRNA基因中較保守的區域設計1對引物和探針，建立熒光定量 PCR方法并檢測其特異性、靈敏性及重復性。

　　結果 該方法在模板濃度為5×100-5×106copies/μL之間呈良好的線(xiàn)性關(guān)系（R2=0.9972）且擴增效率為98.11%;特異性強，能夠區分檢測金黃色葡萄球菌等常見(jiàn)的病原菌;靈敏性高，檢測下限為5copies/μL.比常規PCR的檢測靈敏性高100倍;重復性好，對不同濃度模板進(jìn)行組內和組間重復性試驗的變異系數均低于2%。用熒光定量PCR和普通PCR方法對不同來(lái)源不同類(lèi)型的120份臨床樣品進(jìn)行檢測，結果表明小鼠支原體檢測陽(yáng)性率分別為3.33%（2/60）、1.67%（1/60），細胞樣品支原體檢測陽(yáng)性率均為5%（3/60）。

　　結論  本研究建立的熒光定量PCR方法快速、特異強、靈敏性高、重復性好，可用于實(shí)驗動(dòng)物常見(jiàn)支原體的快速診斷。