(1)復制方法 采用經(jīng)生理鹽水溶解稀釋的卵蛋白(Ovalbumin, OVA)100μg,給6周齡小鼠灌服;同時(shí)給小鼠腹腔注射OVA 100μg和氫氧化鋁(作為增強佐劑)0.1ml,每周1次,共5次。實(shí)驗最后一天經(jīng)口給藥OVA 2mg進(jìn)行過(guò)敏原腸道攻擊。模型小鼠用卵蛋白OVA腸道攻擊3h后,處死小鼠取血及肝臟。用酵素法測定血清中ALT,并對肝組織作常規切片行HE染色及免疫組織化學(xué)染色。
(2)模型特點(diǎn) 模型小鼠的小腸發(fā)生了炎癥反應,鏡下可見(jiàn)小腸絨毛脫落、水腫,并有炎癥細胞浸潤。OVA致敏小鼠血清ALT明顯升高,免疫組織化學(xué)染色顯示,在OVA致敏小鼠的肝組織中,IL4及IL6陽(yáng)性細胞數也明顯升高。模型小鼠發(fā)生食物過(guò)敏反應時(shí)其空腸可引起超敏反應。此時(shí),腸道通透性增加且不能很好消化食物,部分仍具有抗原性的食物可被小腸吸收,通過(guò)門(mén)靜脈進(jìn)入肝臟而誘發(fā)免疫反應并損傷肝組織。OVA致敏小鼠血清ALT明顯升高,免疫組織化學(xué)染色顯示,在OVA致敏小鼠的肝組織中,IL4及IL6陽(yáng)性細胞數也明顯升高。模型小鼠的肝組織中,可見(jiàn)肝中央靜脈及門(mén)管區周?chē)忻黠@的肝細胞巢狀壞死,并可見(jiàn)大量以淋巴細胞為主的炎癥細胞浸潤。本模型復制方法簡(jiǎn)單,可控性好,疾病表現與人體類(lèi)似。
(3)比較醫學(xué) 近年來(lái),臨床上過(guò)敏性疾病的發(fā)病率不斷增加,其中因食物過(guò)敏而導致的疾病發(fā)生率也日趨上升。目前,食物過(guò)敏已成為全世界都廣泛關(guān)注的公共衛生問(wèn)題之一。眾所周知,幾乎所有的食物致敏原都是蛋白質(zhì),但在食物的多種蛋白質(zhì)中卻只有少數幾種是致敏原。隨著(zhù)轉基因食品的大量生產(chǎn)和使用,轉基因食品的潛在致敏性已愈加引起人類(lèi)的高度重視。建立合適而理想的食物過(guò)敏動(dòng)物模型來(lái)開(kāi)展相關(guān)研究已顯得非常重要和迫切。由于大多數食物致敏原均可引起人的Ⅰ型過(guò)敏反應,其癥狀主要為口腔周?chē)t斑、唇腫、口腔疼痛、舌咽腫、惡心以及嘔吐等。到目前為止,應用犬、幼豬、豚鼠、BALB/c小鼠、C3H/HeJ小鼠、BN大鼠等建立食物過(guò)敏動(dòng)物模型的實(shí)驗研究已有報道,但鑒于國際上尚未建立食物致敏原評估的標準動(dòng)物模型,所以這些動(dòng)物模型均各有優(yōu)缺點(diǎn)。理想的食物過(guò)敏動(dòng)物模型暴露于人體食物致敏原后應能產(chǎn)生過(guò)敏反應,而當它暴露于無(wú)致敏史食物后則不應產(chǎn)生過(guò)敏反應;同時(shí)模型動(dòng)物應能表現出與人類(lèi)相似的對不同食物致敏原產(chǎn)生的過(guò)敏反應強度,模型動(dòng)物對常見(jiàn)食物致敏原產(chǎn)生過(guò)敏反應的強度應大于不常見(jiàn)食物致敏原及無(wú)致敏史食物。雖然模型復制時(shí)灌胃是常用且比較合理的致敏途徑,但由于重組蛋白質(zhì)可能在胃腸道內被蛋白質(zhì)酶水解或不能被吸收,因此其致敏效果尚未最終確定。而采用腹腔注射致敏時(shí),由于模型動(dòng)物機體產(chǎn)生特異 IgE抗體的反應結果,并不能完全代表人體經(jīng)膳食暴露后免疫反應的實(shí)際情況,所以腹腔途徑致敏應慎用。建立食物過(guò)敏動(dòng)物模型時(shí),應用同一種食物致敏原但采取不同的致敏途徑可能會(huì )得到不同甚至相反的結果。研究表明,食物過(guò)敏可以引起機體全身許多器官的變態(tài)反應。由于腸道是機體第一道防線(xiàn),對食物中攝入或空氣吸入的某些抗原具有封閉作用,當小腸組織結構與免疫功能受到損傷時(shí),其不能中和及阻止過(guò)敏原的吸收,此時(shí)機體易發(fā)生過(guò)敏反應;同時(shí)肝臟組織在機體食物過(guò)敏中也受到影響。臨床上因食物過(guò)敏引起的特異性皮膚炎癥患者中,部分患者的血清轉氨酶可升高,而當過(guò)敏食物癥狀好轉時(shí),患者升高的轉氨酶可恢復正常。本方法復制的食物過(guò)敏模型,在過(guò)敏特點(diǎn)和表現形式上與人類(lèi)疾病相似,適合于作食物過(guò)敏機制以及抗過(guò)敏藥物篩選的實(shí)驗研究。