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熒光雙向電泳檢測雌雄小鼠肝組織蛋白組學(xué)的差異-【動(dòng)物實(shí)驗外包服務(wù)】

  目的:檢測雄性和雌性小鼠肝臟組織中蛋白質(zhì)組表達的差異,并探討肝臟疾病中性別差異的機制。

  方法:2D差異凝膠電泳(2D差異凝膠電泳,2D-DIGE)和基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(矩陣輔助激光解吸/電離時(shí)間離場(chǎng)質(zhì)譜),MALDI -TOF-MS)。 C57BL/6J男女小鼠肝組織蛋白質(zhì)組差異表達譜,差異表達蛋白質(zhì)的分離與鑒定,蛋白質(zhì)印跡法在驗證中的應用以及蛋白質(zhì)功能注釋?zhuān)诸?lèi)學(xué)分析等。生物信息學(xué)分析,Kyoto基因和基因組百科全書(shū)的途徑分析。

  結果:二維熒光差異凝膠電泳-圖像分析后,獲得了1767個(gè)蛋白斑點(diǎn),其中325個(gè)蛋白斑點(diǎn)相差超過(guò)1.5(Pu003c0.05)。選擇了78個(gè)不同的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF-MS鑒定,得到48個(gè)不同的表達蛋白質(zhì)。其中,與雌性小鼠相比,雄性小鼠肝組織中有14種高表達蛋白和34種表達不足的蛋白。選擇了六個(gè)不同的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)進(jìn)行Western blot驗證,證明了2D-DIGE結果的可靠性。 GO分析的結果表明,雄性和雌性小鼠肝臟組織中涉及的不同蛋白質(zhì)廣泛分布于細胞組成,分子功能和生物學(xué)過(guò)程中。 KEGG通路分析表明,差異蛋白涉及六個(gè)信號通路。

  結論:C57BL/6J雄性和雌性小鼠肝組織蛋白質(zhì)表達差異的檢測結果提供了基礎生物學(xué)信息,為研究性別特異性肝病的分子機制提供了有用的線(xiàn)索。

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