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實(shí)驗動(dòng)物免疫方案

    1、抗原: 蛋白質(zhì)、多肽、細胞器、細胞、組織等。

 

    2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。

 

    3、不同動(dòng)物免疫所需抗原量(以蛋白免疫為例

  >18-20kDa <18-20kDa
動(dòng)物 抗原量 最佳抗原量 抗原量 最佳抗原量
兔子 20-200 100 50-400 200
小鼠 2- 40 15 4- 60 40
大鼠 10-50 30 20-150 50
綿羊 100-1000 200 200-1000 400
母雞 20-200 100 50-400 200
單位微克

 

       4、免疫方案(以免疫兔子為例) :

天數 0 14 28 38 56 66 87
注射 x x x   x    
采血 2ml     2ml   2+20ml 2+50-70ml

 


 

       5、注意:

       第一次免疫用完全佐劑與免疫原混合,以后加強免疫用不完全佐劑與免疫原 混合,采取多點(diǎn),時(shí)間間隔式免疫法。

 

       如果用細胞免疫兔子,那么每次免疫所需細胞量為 2-3 x 107cells。  在連續免疫完三次后,需要少量取血進(jìn)行ELISA檢測,檢測所免疫動(dòng)物的抗 體滴度,一般滴度能達到 1:10,000-50,000。在處死所免疫的動(dòng)物前一周應加 強一次免疫。

 

       如果用小鼠免疫,可以尾靜脈小量采血(大約 50μ l) ,最后取眼球大量采血 (大約 500-1000μ l) ;如果用兔子免疫,可以耳緣靜脈小量取血(大約 2mL),  最后心臟大量取血(50-100mL)。

   

       按血清制備的標準方法將血清分離,并且分裝成小份,儲藏在- 80oC。  

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