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單細胞電泳技術(shù)(二)

單細胞電泳技術(shù)(二)

      5 制片:在載玻片兩端用搭橋法放置蓋片,兩搭橋蓋片間寬度為1cm,將細胞懸液與配置好的1%的低熔點(diǎn)瓊脂糖(LMP)以1:1的比例在小離心管內混勻;在橋面蓋片和載玻片間灌入約100ul細胞與膠的混合液,置于4℃。

      6 膠凝固20min后,小心從載玻片一側抽取下各張搭橋蓋片,抽取過(guò)程中注意保持膠面平整。

      7 裂解:將載玻片移入裂解槽,注入裂解液,浸沒(méi)玻片,4℃避光裂解1.5-2h。

      8 水洗:將載玻片移入新的裂解槽,注入三蒸水浸沒(méi)玻片,4攝氏度水洗3次,每次5min。

      9 解旋:將載玻片移入新的裂解槽,注入電泳緩沖液,浸沒(méi)玻片,4攝氏度解旋20min。

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