目的：構建猴D型逆轉錄病毒p27蛋白，建立檢測猴D型逆轉錄病毒的流式免疫熒光微球檢測技術(shù)。

　　方法：p27基因片段經(jīng)PCR擴增，連接pGEX-4T-1表達載體，轉化BL21（DE3）表達。 SDS-PAGE 分析蛋白質(zhì)表達的形態(tài)和最佳誘導時(shí)間。 GST樹(shù)脂用于純化目的蛋白，用磁珠包被，建立流動(dòng)免疫熒光微球檢測技術(shù)，用于臨床樣品檢測。

　　結果：重組蛋白在可溶性上清液中表達，最佳誘導時(shí)間為4小時(shí)。包覆磁珠后，我們成功建立了流式免疫熒光微球檢測技術(shù)。陽(yáng)性血清在稀釋 81 倍后仍可檢測為陽(yáng)性。不與其他猴病原體的陽(yáng)性血清發(fā)生交叉反應，特異性強。 ..可與ELISA法同時(shí)使用。測試了二十四個(gè)臨床樣本。其中三個(gè)樣本的流動(dòng)免疫熒光微球測試結果為陽(yáng)性，兩個(gè) ELISA 測試結果為陽(yáng)性，一個(gè)為陰性。兩種方法均為96?

　　結論：成功表達猴D逆轉錄病毒p27蛋白，利用該蛋白建立流式免疫熒光微球檢測技術(shù)，靈敏度高、特異性強、樣品需求量低，后續多流式用于推廣應用。熒光抗體法微球檢測技術(shù)奠定了基礎。