目的：  以基因工程技術(shù)制備猴免疫缺陷病毒(SIV)的 SIV30蛋白作為抗原診斷試劑,建立免疫梳方法(IC)用于特異性檢測實(shí)驗猴血清中抗SIV的抗體IgG?

　　方法：  應用原核表達載體pGEX-4T-1構建SIV SIV30 基因的重組表達質(zhì)粒,并在感受態(tài)細胞BL21中表達,將該重組蛋白純化后作為診斷抗原,建立免疫梳標準化檢測程序,并應用于臨床檢測?

　　結果：  最佳抗原包被量為0.02mg/mL;制備好的IC均能夠特異性檢測到相應的SIV陽(yáng)性血清而不與其他病毒血清間發(fā)生交叉反應,表明該檢測方法特異性強;敏感性分析結果表明,SIV30蛋白能夠敏感地檢測到1∶400倍稀釋的SIV陽(yáng)性血清;穩定性和重復性試驗結果表明,同一樣品重復檢測3次,變異系數(CV) 均小于10%;利用該檢測方法在對10份可疑猴血清樣品進(jìn)行檢測,IC與ELISA檢測結果一致率為100.0%,Kappa =1：000?

　　結論：  原核表達了SIV30蛋白,制備了IC,并應用于臨床檢測? 該檢測方法靈敏度高?特異性強?重復性好,具有良好的實(shí)用性?