目的：探究ripply1基因在斑馬魚(yú)早期背腹軸發(fā)生過(guò)程中的作用。

　　方法：利用斑馬魚(yú)整封原位雜交技術(shù)揭示ripply1基因在斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)育過(guò)程中的表達模式,通過(guò)顯微注射技術(shù)在胚胎1細胞期注射ripply1的mRNA來(lái)高表達Ripply1蛋白并在后期觀(guān)察胚胎背腹標記基因的變化及胚胎形態(tài)變化。利用Tol2轉基因技術(shù)構建ripply1啟動(dòng)子驅動(dòng)的GFP轉基因魚(yú)。

　　結果：原位雜交結果顯示ripply1基因在斑馬魚(yú)原腸早期胚盾期特異表達在胚盾處,即預定的背部。高表達ripply1后,在胚盾期背部標記基因表達范圍擴大,腹部標記基因表達減弱,受精后24小時(shí)胚胎表現出嚴重的背部化表型:頭部增大,腹部卵黃延伸減弱,尾部軀干及尾部區域減少,有的甚至形成了第二個(gè)體軸。得到的轉基因魚(yú)揭示ripply1母源表達,并且轉錄起始位點(diǎn)上游1200個(gè)堿基驅動(dòng)的GFP能模擬內源基因的表達圖式。

　　結論：ripply1可能參與斑馬魚(yú)胚胎早期背腹軸的發(fā)生。