目的 比較甲型 H1N1 流感病毒 PR8 毒株感染老年和年輕 C57BL/ 6 小鼠誘導肺組織 CD8+ T 細胞特異性免疫應答的能力。

　　方法 使用 490 PFU 的 PR8 病毒分別滴鼻感染年輕(3 月齡)和老年(24 月齡)C57BL/ 6 小鼠,連續 14 d 每日記錄其體重變化及死亡情況。 在感染后第 8 天分離小鼠肺組織細胞,使用流式細胞術(shù) (fluorescence-activated cell sorting,FACS)技術(shù)檢測病毒抗原特異性 CD8+ T 細胞數量及功能:MHC-I 表位肽四聚體法(tetramer staining)染色流感特異性 CD8+T 細胞,細胞內細胞因子染色法( intracellular cytokine staining,ICS)檢測 CD8+T 細胞經(jīng)流感病毒特異性肽刺激后分泌細胞因子水平包括 TNF-α、IFN-γ、IL-2 以及與 CD8+ T 細胞殺傷功能有關(guān)的顆粒酶 B(Granzyme B)的水平。

　　結果 相同量的 PR8 流感病毒感染小鼠后,老年小鼠體重下降更多,死亡率顯著(zhù)高于年輕小鼠(P < 0. 01)。 另一方面,老年組小鼠誘生的病毒特異性 CD8+T 細胞比例顯著(zhù)低于年輕組;同時(shí), 老年組 CD8+T 細胞活化后分泌細胞因子 TNF-α、IFN-γ、IL-2 的水平顯著(zhù)低于年輕組;此外,老年組 CD8+T 細胞表達 granzyme B 的水平同樣顯著(zhù)低于年輕組。

　　結論 PR8 流感病毒感染老年和年輕 C57BL/ 6 小鼠后,老年小鼠肺組織誘導產(chǎn)生的特異性 CD8+T 細胞的數量減少且功能降低。 結果表明:與年輕小鼠相比,老年小鼠肺組織 CD8+ T 細胞特異性免疫應答功能受損。