目的 建立 Marcksl1 基因敲除小鼠,初步探究該基因缺失對造血系統發(fā)育的影響。

　　方法 利用 CRISPR/ Cas9 技術(shù)構建 Marcksl1 基因敲除小鼠,通過(guò) PCR 技術(shù)以及 Sanger 測序方法鑒定小鼠基因型。 通過(guò)將敲除 小鼠與野生型小鼠雜交,分析敲除小鼠的傳代情況。 通過(guò)雜合子小鼠相互雜交,分析發(fā)育不同階段純合子、雜合子 和野生型小鼠的占比。 分離小鼠胎肝,利用血常規以及流式細胞術(shù)分析該基因缺失對造血系統的影響。

　　結果 PCR 結合 Sanger 測序結果表明 Marcksl1 基因敲除小鼠構建成功。 對不同階段胚胎小鼠基因型鑒定和數量統計,發(fā) 現小鼠 Marcksl1 基因敲除造成的胚胎死亡發(fā)生于胚胎發(fā)育后期。 通過(guò)血常規與流式細胞分析,結果表明 Marcksl1 基因缺失在 E15. 5 d 時(shí)不影響白細胞,紅細胞以及血小板數量,但胎肝中造血干細胞比例顯著(zhù)增多。

　　結論 本研究成功建立 Marcksl1 基因敲除小鼠,并發(fā)現該基因缺失影響造血干細胞占比。 本研究為進(jìn)一步了解該基因在胚胎發(fā) 育和造血系統中的功能提供動(dòng)物模型。