目的：明確TOLL樣受體2（TLR2）與microRNA144（miR-144）作用之間的關(guān)系。

　　方法：利用不同濃度的miR-144的模擬物（mimics）和抑制劑（inhibitor）瞬時(shí)轉染大鼠巨噬細胞系NR8383細胞，RT-qPCR檢測miR-144和TLR2及其下游分子TNF-α的表達。利用大鼠肝臟cDNA為模板，PCR獲取目的片段（即含miR-144 野生及突變結合位點(diǎn)的TLR2 mRNA的3’UTR區）；用SacⅠ、XbaⅠ雙酶切pmirGLO報告基因載體和含miR-144野生及突變結合位點(diǎn)的TLR2 mRNA的3’UTR區，構建攜帶上述片段的雙熒光素酶報告基因，并通過(guò)PCR、雙酶切、DNA測序鑒定構建的重組質(zhì)粒，即pmir-TLR2-3’UTR及pmir-mutant-TLR2-3’UTR；并用miR-144 的mimics 與雙熒光素酶報告基因共轉染明確miR-144 與TLR2 mRNA的3’UTR 區的靶向關(guān)系。

　　結果：瞬時(shí)轉染100 nmol/L miR-144 mimics后，NR8383細胞中miR-144表達顯著(zhù)升高，而TLR2及其下游分子TNF-α表達顯著(zhù)下降；而100 nmol/L miR-144 inhibitor作用則相反。PCR和雙酶切DNA測序結果證實(shí)pmir-TLR2-3’UTR及pmir-mutant-TLR2-3’UTR重組載體構

　　建成功；用100 nmol/L miR-144 mimics與空載體及上述兩個(gè)構建體分別共轉染HEK 293T細胞后，pmir-TLR2-3’UTR轉染組相對熒光素酶活性顯著(zhù)降低。

　　結論：miR-144通過(guò)靶向結合TLR2 mRNA的3’UTR區負性調節TLR2及其下游促炎因子的表達。