目的 分離培養裸鼴鼠皮膚成纖維細胞并對其進(jìn)行鑒定，探討裸鼴鼠皮膚成纖維細胞是否具有分泌外泌體的能力。

　　方法 無(wú)菌取新生裸鼴鼠背部皮膚，剪碎成1～2 mm2 大小，將組織塊平鋪于細胞培養皿中，待貼壁后以低糖DMEM（含20%胎牛血清）培養液進(jìn)行培養，胰酶消化法對傳代培養細胞進(jìn)行純化; 通過(guò)細胞免疫熒光、蛋白質(zhì)印跡法檢測波形蛋白表達情況，對成纖維細胞進(jìn)行鑒定; 待細胞生長(cháng)至融合度約80%時(shí)，改換低糖DMEM（含20%去除外泌體的胎牛血清）培養48 h后收集上清液，超高速離心法分離外泌體，透射電鏡觀(guān)察形態(tài)，納米流式分析顆粒直徑，蛋白質(zhì)印跡法檢測外泌體相關(guān)特異性蛋白表達情況，進(jìn)行外泌體鑒定。

　　結果 新生裸鼴鼠背部皮膚組織塊培養30 h后可見(jiàn)少量細胞自組織塊游離出，培養5 d后可見(jiàn)大量細胞自組織塊游離生長(cháng)，細胞呈細長(cháng)梭形或不規則多角形，放射狀生長(cháng)。細胞免疫熒光及蛋白質(zhì)印跡法檢測均證實(shí)分離細胞表達波形蛋白。超高速離心法離心細胞上清液，透射電鏡下可觀(guān)察到膜狀杯托樣外泌體，納米流式分析粒徑在46.75～206.75 nm，蛋白質(zhì)印跡法檢測顯示其對外泌體特異性蛋白 CD63、腫瘤易感基因101（tumor susceptibilitv gene，TSG101）和熱休克蛋白70（heat shock protein 70，Hsp70）具有特異性。

　　結論 分離培養的細胞具有成纖維細胞的形態(tài)學(xué)特征，并表達成纖維細胞的特征分子波形蛋白。裸鼴鼠皮膚成纖維細胞具有分泌外泌體的能力，為研究裸鼴鼠外泌體所攜帶的生物活性分子及其生物學(xué)功能提供了基礎。