目的：在活體兔模型中，用藥物對晶狀體囊進(jìn)行圍手術(shù)期治療以減少囊膜混濁。晶狀體再填充手術(shù)是治療白內障晶狀體患者的潛在治療干預。將晶狀體材料替換為可注射（生物）聚合物，該聚合物保留了晶狀體的自然機械和光學(xué)特性，從而允許調節。晶狀體上皮細胞介導的囊膜混濁的發(fā)生對調節和視力有負面影響，在這種晶狀體修復方法中應避免。

　　方法：使用兔體內動(dòng)物模型，用硅酮基凝膠狀聚合物代替晶狀體，并用藥物同時(shí)治療晶狀體上皮。由于藥物組合和植入時(shí)間不同，采用了案例研究方法。研究了以下藥物長(cháng)期預防囊膜混濁的可能性：放線(xiàn)菌素D、甲氨蝶呤、紫杉醇和吐溫-20。所有藥物均使用透明質(zhì)酸載體。家兔在植入后進(jìn)行了長(cháng)達4年的臨床隨訪(fǎng)。采用MRI和共聚焦顯微鏡對眼、角膜和晶狀體進(jìn)行分析。

　　結果：含有放線(xiàn)菌素D的治療組合通常導致囊膜纖維化的出現最少。在沒(méi)有放線(xiàn)菌素D的情況下使用吐溫-20或紫杉醇會(huì )導致更早和明顯的纖維化反應。個(gè)別動(dòng)物的囊膜混濁程度差異很大。藥物在透明質(zhì)酸載體中的應用似乎是一種安全的方法，避免了角膜內皮的損傷。

　　結論：在兔晶狀體再填充模型中，已經(jīng)證明了4年以上長(cháng)期預防纖維化的可行性。

　　簡(jiǎn)介：白內障是一種常見(jiàn)的疾病，如果不治療會(huì )導致失明。治療包括摘除渾濁的晶狀體核和皮質(zhì)，現在用硅樹(shù)脂或丙烯酸樹(shù)脂制成的人工晶狀體（IOL）替換。這個(gè)人工晶狀體放在空的晶狀體囊中。白內障手術(shù)可以被認為是非常成功的，盡管并發(fā)癥是眾所周知的，例如后囊混濁的發(fā)生，它包括晶狀體上皮細胞的活化、增殖和遷移，這些細胞可以進(jìn)入典型的上皮-間充質(zhì)轉換?；鞚岚l(fā)生在植入晶狀體的后側面，沿著(zhù)晶狀體囊，在視覺(jué)軸內，用YAG激光治療。所描述的晶狀體上皮的行為出現在與植入的人工晶體接觸的晶狀體囊的所有部分。由于目前的人工晶體通常不適合配鏡，通過(guò)YAG激光治療，視覺(jué)軸從纖維組織中清除，因此整個(gè)裝置在恢復視力方面是功能性的。在文獻中已經(jīng)出現了幾種策略，其中之一是使用可注射的、凝膠狀的、透鏡材料替代聚合物。該方法依賴(lài)于保持凝膠的功能性囊膜。囊膜混濁不能通過(guò)激光治療來(lái)解決，因為囊膜的完整性對于調節和保持凝膠的位置是關(guān)鍵的。因此，為了創(chuàng )造一個(gè)功能性植入物，系統必須保持沒(méi)有囊膜混濁。在體內兔和猴模型的研究中已經(jīng)顯示了使用可注射凝膠狀聚合物恢復調節的可行性。同時(shí)，有研究表明，調節材料的使用可以引起晶狀體上皮的強烈纖維化反應，說(shuō)明上皮的治療似乎是必要的。但是，不能排除選擇合適的材料更換透鏡或連接囊膜也可以防止混濁。Hao等人結果似乎表明，在注射聚硅氧烷透鏡再填充凝膠的情況下，透鏡上皮細胞可以增殖，盡管同時(shí)在植入一個(gè)月后無(wú)法再檢查眼底，表明也可能出現纖維化反應。在這項研究中，通過(guò)隨訪(fǎng)晶狀體囊纖維化作為不同藥物對晶狀體上皮進(jìn)行圍手術(shù)期治療的一項功能，評估了家兔體內補充晶狀體的長(cháng)期混濁反應。這些藥物的選擇是因為它們具有殺死細胞、防止增殖、防止纖維化或從囊壁主動(dòng)分離細胞的潛力。通過(guò)對兔晶狀體囊膜標本的離體研究和家兔體內研究，選擇甲氨蝶呤（MTX）和放線(xiàn)菌素D（AD）治療晶狀體上皮。在進(jìn)行的體內研究中，觀(guān)察到用甲氨蝶呤/放線(xiàn)菌素D混合物治療的兔眼在4個(gè)月時(shí)沒(méi)有出現后囊混濁，而沒(méi)有藥物治療囊膜混濁則在術(shù)后6周開(kāi)始。由于紫杉醇（PTX）在血管介入治療中常用于藥物洗脫支架和藥物包衣球囊，因此在防止后囊混濁的抗增殖潛力方面，將ptx納入考慮范圍。除藥物外，還測試了Tween-20清潔劑溶解晶狀體上皮細胞的潛力。為了確保安全使用，在低滲環(huán)境下，將藥物加入透明質(zhì)酸鈉中。低滲透壓有助于殺死晶狀體上皮細胞。為了控制藥物輸送，避免使用長(cháng)期藥物輸送裝置，圍手術(shù)期將治療時(shí)間設定為5分鐘。使用硅聚合物進(jìn)行了長(cháng)達7個(gè)月至4年的長(cháng)期植入，硅聚合物在物理、機械和光學(xué)性能方面被證明是一種優(yōu)良的晶狀體替代材料。

　　材料和方法：兔子的眼睛被植入了一種柔韌的硅樹(shù)脂聚合物，可以調節。由于藥物組合和植入時(shí)間不同，動(dòng)物研究可以被視為一系列病例研究。在植入前，用化學(xué)化合物處理殘留的晶狀體上皮。三個(gè)治療組共12眼接受評估。治療方法如下：（1）以藥物為基礎（使用吐溫-20或MTX）；（2）僅使用吐溫-20；以及（3）PTX+吐溫-20。所有治療藥物均在低滲條件下以透明質(zhì)酸給藥。除了肉眼觀(guān)察、臨床觀(guān)察外，還對原位晶狀體囊和角膜內皮進(jìn)行了顯微共聚焦成像。

　　植入手術(shù)：用30 mg/kg氯胺酮和5 mg/kg鹽酸二甲苯嗪的混合物麻醉家兔。術(shù)前用托吡卡胺和鹽酸苯腎上腺素眼液（10.0%）擴張瞳孔。形成一個(gè)3.0 mm透明角膜切口。將肝素鈉（5000 IU/0.2 ml）注射到前房，然后注射透明質(zhì)酸鈉（1.0%）。用15度顯微手術(shù)刀進(jìn)行透明角膜穿刺術(shù)。囊內超聲乳化術(shù)，經(jīng)第二次穿刺注入前房。將晶狀體擊碎后吸出，作為準備步驟，透明質(zhì)酸鈉2.3%被注入前房以保護角膜內皮。然后注射用于溶解和/或殺死晶狀體上皮細胞（LEC）的藥物溶液，使囊袋充盈。5分鐘后，使用超聲乳化裝置小心地用雙手抽吸載藥溶液。一個(gè)專(zhuān)門(mén)設計的直徑為2.7毫米的硅膠膜塞通過(guò)囊膜進(jìn)入囊袋?？盏哪掖惶畛渚酆衔?，方法是將一根25口徑的套管插入囊袋，然后注入填充聚合物，直到外科醫生判斷囊袋已完全填充。插管被收回，塞子被放置在關(guān)閉囊膜的位置。兩個(gè)切口均用10-0尼龍縫合，前房用注射平衡鹽水重新擴張。最后，所有家兔均接受結膜下注射慶大霉素40 mg/ml，術(shù)后每日給予慶大霉素滴眼液（10 mg/ml）、醋酸潑尼松龍滴眼液和氧氟沙星滴眼液14天。此外，通過(guò)飲用水給藥7天。后續程序：術(shù)后1個(gè)月、3個(gè)月和6個(gè)月，以及術(shù)后3個(gè)月至4年，在全身麻醉（使用如上所述的相同麻醉方案）下進(jìn)行開(kāi)縫燈檢查和攝影記錄。用共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM）對角膜內皮進(jìn)行分析。

　　預防囊膜混濁：用含活性化合物的OVD混合物溶解/嵌入透明質(zhì)酸鈉中，預防囊膜混濁。在乙醇中制備1×10-1 M AM和PTX和在二甲基亞砜中制備1×10-1 M MTX的儲備溶液，用純水進(jìn)一步稀釋至1×10?5 M AD、PTX或MTX。濃度為0.05-0.5%（v/v）的吐溫-20可用于溶解哺乳動(dòng)物細胞，因此吐溫-20在HA中以0.025%（v/v）的濃度應用。用離子交換樹(shù)脂凈化得到純水。人工晶體檢查：在不同的植入時(shí)間后，處死動(dòng)物，摘除眼睛并固定在TOTO固定液中。眼睛在這種固定液中冷藏，直到進(jìn)一步分析。T磁共振成像：根據Stachs的研究，在選定的病例中，用7.1t磁共振掃描儀在體外獲得了整只眼睛的軸向球形截面。

　　結果：手術(shù)和宏觀(guān)隨訪(fǎng)：在三個(gè)不同治療組12只兔子的12只眼睛中進(jìn)行了晶狀體再填充手術(shù)，所有病例均成功地進(jìn)行了晶狀體再填充手術(shù)。手術(shù)期間未發(fā)生并發(fā)癥。在隨訪(fǎng)期間，術(shù)后4年采用裂隙燈檢查監測囊袋混濁的發(fā)生情況。在很大程度上觀(guān)察到混濁時(shí)，動(dòng)物被殺死。術(shù)后并發(fā)癥也導致動(dòng)物死亡。部分病例在封堵區發(fā)現后粘連。通過(guò)吐溫/放線(xiàn)菌素D治療的缺失和吐溫-20單獨或吐溫-20和紫杉醇聯(lián)合治療組的混濁大量存在，可以清楚地說(shuō)明治療對PCO形成的影響。MRI圖像顯示了對照眼中與晶狀體形狀相關(guān)的補充晶狀體的輪廓。這些圖像是在植入后拍攝的，在眼睛中存在3年和9個(gè)月，可能不能直接代表重新填充后的原始形狀。

　　晶狀體上皮細胞反應：用共聚焦顯微鏡觀(guān)察晶狀體上皮在完整晶狀體中的熒光標記。圖4和圖5所示為不同治療組的補充鏡片的代表性圖像，圖6所示為對照鏡片的代表性圖像。此外，在圖7中，顯示了植入4年和3個(gè)月后MTX/AD/HA組中纖維組織鏈的詳細復合圖像。在有包膜混濁的情況下觀(guān)察到了很大的多樣性和特征。

　　角膜內皮細胞反應：角膜用共聚焦顯微鏡進(jìn)行熒光標記和觀(guān)察。當考慮到內皮層可以計數時(shí)，一般情況下，填充眼和對照眼的角膜內皮細胞的數量和分布具有可比性，如圖8所示，沒(méi)有顯著(zhù)差異。治療眼和對照眼的典型共焦圖像可以看出，大多數角膜顯示出均勻的內皮層，沒(méi)有損傷的跡象。只有三個(gè)角膜受損。

　　結論：在本研究中，總結了長(cháng)期預防纖維化的可行性，即在兔模型中超過(guò)4年的時(shí)間，已經(jīng)證明了使用放線(xiàn)菌素D與透明質(zhì)酸結合的內晶狀體囊袋圍手術(shù)期治療的可行性。吐溫-20和/或紫杉醇的使用不會(huì )導致包膜纖維化的降低。這就為用模擬光學(xué)的生物材料來(lái)取代老化的晶狀體創(chuàng )造了機會(huì )。這種生物材料模擬了年輕晶體透鏡的光學(xué)和生物力學(xué)特性，以恢復視力和調節能力。