目的:條件敲除小鼠神經(jīng)干細胞LSD1基因后,通過(guò)觀(guān)察小鼠神經(jīng)細胞增殖情況及小鼠行為的表現,揭示LSD1的神經(jīng)生物學(xué)功能。
方法 將LSD1(flox/flox)轉基因小鼠與神經(jīng)干細胞特異性表達Cre重組酶的Nestin-cre(Tg)轉基因小鼠進(jìn)行的雜交,即利用Cre-LoxP系統,繁殖出LSD1(flox/flox) Nestin-cre(Tg)基因型小鼠,即為所需神經(jīng)干細胞LSD1條件性敲除小鼠(LSD1-CKO),LSD1(flox/flox)做為對照小鼠。進(jìn)一步運用免疫熒光染色方法檢測小鼠海馬DG區神經(jīng)細胞的增殖;并通過(guò)小鼠的糖水偏好、強迫游泳及新物體識別等實(shí)驗檢測小鼠的行為表現。
結果 與LSD1(flox/flox)小鼠相比,LSD1-CKO小鼠海馬區神經(jīng)細胞增殖顯著(zhù)降低(P=0.023);糖水偏好系數降低(P=0.0075);強迫游泳實(shí)驗中不動(dòng)時(shí)間明顯增加(P<0.05);并在新物體識別實(shí)驗中表現出記憶力顯著(zhù)下降現象(P=0.0019)。
結論 小鼠腦神經(jīng)干細胞敲除LSD1基因,海馬區神經(jīng)細胞增殖降低,LSD1-CKO小鼠表現出負面情緒和記憶障礙。