目的：研究Foxo3a基因對大鼠卵巢顆粒細胞體外發(fā)育的調控及其預防順鉑卵巢毒性作用。

　　方法：大鼠原代顆粒細胞體外 培養，利用HE染色法及免疫熒光法進(jìn)行原代顆粒細胞鑒定；構建攜帶Foxo3a基因的重組腺病毒AD-rFoxo3a，利用RT-PCR及 Western-blot法檢測Foxo3a表達；實(shí)驗分為3組：實(shí)驗組（AD-rFoxo3a組）、陰性對照組（rAD組）及空白對照組（Control組），分別 繪制各組細胞生長(cháng)曲線(xiàn)，Western-blot法檢測各組cyclin D1、p27、Bax、Bim蛋白表達，利用流式細胞術(shù)、Hoechst33342/PI法分別 檢測細胞周期及細胞凋亡情況，流式細胞術(shù)檢測各組細胞加入最適濃度順鉑后細胞凋亡情況。

　　結果：（1）體外分離培養大鼠原 代卵巢顆粒細胞存活率>90%，細胞純度>95%；（2）重組腺病毒AD-rFoxo3a感染顆粒細胞36 h后Foxo3a基因在mRNA水平高 表達，感染48 h后在蛋白水平高表達；（3）實(shí)驗組細胞增殖受到抑制，G1期細胞比例及細胞凋亡率較空白對照組及實(shí)驗對照組增 加（P<0.01），后兩組差異無(wú)統計學(xué)意義；（3）實(shí)驗組Bim、p27、cyclin D1蛋白較對照組高表達，而各組Bax蛋白表達無(wú)明顯差異； （4）加入順鉑24 h后實(shí)驗組細胞凋亡率高于空白對照組及實(shí)驗對照組（P<0.01），后兩組細胞凋亡率差異無(wú)統計學(xué)意義。

　　結論：過(guò)表達Foxo3a基因在體外可能通過(guò)促進(jìn)cyclin D1和p27蛋白表達誘導大鼠卵巢顆粒細胞靜止在G1期，通過(guò)增加Bim蛋白表達 誘導顆粒細胞凋亡；同時(shí)過(guò)表達Foxo3a基因在體外不能逆轉順鉑導致的顆粒細胞凋亡，其對于卵泡發(fā)育的調控及預防順鉑對 卵巢的毒性作用還有待體內實(shí)驗進(jìn)一步研究。