中洪博元生物 免疫熒光促銷(xiāo)進(jìn)行中..
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
概念:
將免疫學(xué)方法(抗原抗體特意結合)與熒光標記技術(shù)(immunofluorescence techni)結合起來(lái)研究特異蛋白抗原在細胞內分布的方法。由于熒光素所發(fā)的熒光可在熒光顯微鏡下檢出,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見(jiàn)熒光所在的細胞或組織,利用定量技術(shù)測定含量,從而可對抗原進(jìn)行細胞定性和定位分析。
直接法
將標記的特異性熒光抗體,直接加在抗原標本上,經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色,用水洗去未參加反應的多余熒光抗體,室溫下干燥后封片、鏡檢。
間接法
如檢查未知抗原,先用已知未標記的特異抗體(第一抗體)與抗原標本進(jìn)行反應,用水洗去未反應的抗體,再用標記的抗抗體(第二抗體)與抗原標本反應,使之形成抗原—抗體—抗體復合物,再用水洗去未反應的標記抗體,干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體,則表明抗原標本是已知的,待檢血清為第一抗體,其它步驟的抗原檢查相同。
標記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同于血清球蛋白有種的特異性,如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白發(fā)生反應,因此,制備標記抗體適用于雞任何抗原的診斷。
2、實(shí)驗所用的標本
實(shí)驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類(lèi),前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標本最常用、最基本的方法,對于組織形態(tài)保存好,且能作連續切片,有利于各種染色對照觀(guān)察;還能長(cháng)期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過(guò)程對組織內抗原暴露有一定的影響,但可進(jìn)行抗原修復,是免疫組化中首選的組織標本制作方法。
3、實(shí)驗所用的抗體
免疫組化實(shí)驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體,單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動(dòng)物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動(dòng)物后,從動(dòng)物血中所獲得的免疫血清,是多個(gè)B淋巴細胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。
4、常見(jiàn)熒光素的特性
1)FITC:黃色結晶粉末,吸收光:490~495nm,發(fā)射光:520~530nm,明亮的黃綠色熒光。
2)RB200:橘紅色粉末,吸收光570nm,發(fā)射光595~600nm,橘紅色熒光。
3)TRITC:紫紅色粉末,吸收550nm,發(fā)射光620nm,橙紅色熒光。
4)鑭系:Eu、Tb
5) PE:吸收光490~560nm,發(fā)射光595nm,紅色熒光。
6)其它:酶作用后產(chǎn)生熒光物質(zhì)。