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CCK8檢測細胞增殖/毒性的原理

一、CCK8檢測細胞增殖/毒性的原理

CCK8檢測細胞增殖/毒性的原理

Cell Counting Kit-8(簡(jiǎn)稱(chēng)cck-8)試劑可用于簡(jiǎn)便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazan dye)。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細胞增殖和毒性分析。

用途:藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗

CCK8的優(yōu)點(diǎn)
  • 使用方便,省去了洗滌細胞,不需要放射性同位素和有機溶劑;
  • CCK-8法能快速檢測;
  • CCK-8法的檢測靈敏度很高,甚至可以測定較低細胞密度;
  • CCK-8法的重復性?xún)?yōu)于MTT 法;
  • CCK-8法對細胞毒性??;
  • CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,毋需預制,即開(kāi)即用。

CCK8的缺點(diǎn)
  • 與MTT法相 比,CCK8和XTT的價(jià)格比較貴。
  • CCK8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養基顏色接近,不注意的話(huà)容易產(chǎn)生漏加或多加。

與以往的增殖/毒性測定試劑相比較

檢測方法
MTT法
XTT法
WST-1法
CCK8法
甲臢產(chǎn)物的水溶性
差(需加有機溶劑溶解)
產(chǎn)品性狀
粉末
2瓶溶液
溶液
1瓶溶液
使用方法
配成溶液后使用
現配現用
即開(kāi)即用
即開(kāi)即用
檢測靈敏度
很高
很高
檢測時(shí)間
較長(cháng)
較短
較短
最短
檢測波長(cháng)
560-600nm
420-480nm
420-480nm
430-490nm
細胞毒性
高,細胞形態(tài)完全消失
很低,細胞形態(tài)不變
很低,細胞形態(tài)不變
很低,細胞形態(tài)不變
試劑穩定性
一般
較差
一般
很好
批量樣品檢測
可以
非常適合
非常適合
非常適合
便捷程度
一般
便捷
便捷
非常便捷

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