CCK8實(shí)驗步驟

2、向培養板加入10μl不同濃度的待測物質(zhì)。

3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時(shí)間（例如：6、12、24或48小時(shí)）。

4、向每孔加入10μl CCK8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì )影響OD值的讀數）。

5、將培養板在培養箱內孵育1-4小時(shí)。

6、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。

7、若暫時(shí)不測定OD值，可以向每孔中加入10μl  0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時(shí)內測定，吸光度不會(huì )發(fā)生變化。

   CCK8實(shí)驗步驟原理：

2、WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線(xiàn)粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長(cháng)處測定OD值，間接反映活細胞數量。

3、CCK法應用非常廣泛，如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。