種類(lèi):瞬時(shí)轉染的外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個(gè)宿主細胞中可存在多個(gè)拷貝數,產(chǎn)生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動(dòng)子和其它調控元件的分析。一般來(lái)說(shuō),超螺旋質(zhì)粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時(shí)內(依賴(lài)于各種不同的構建)分析結果,常常用到一些報告系統如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來(lái)幫助檢測。
磷酸鈣法和脂質(zhì)體法是利用不同的載體物質(zhì)攜帶質(zhì)粒通過(guò)直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進(jìn)入細胞;
病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染細胞的方法使得其進(jìn)入細胞。但是由于電擊法和磷酸鈣法的實(shí)驗條件控制較嚴、難度較大;病毒法的前期準備較復雜、而且可能對于細胞有較大影響;
所以現在對于很多普通細胞系,一般的瞬時(shí)轉染方法多采用脂質(zhì)體法。 利用脂質(zhì)體轉染法最重要的就是防止其毒性,因此脂質(zhì)體與質(zhì)粒的比例,細胞密度以及轉染的時(shí)間長(cháng)短和培養基中血清的含量都是影響轉染效率的重要問(wèn)題,通過(guò)實(shí)驗摸索的合適轉染條件對于效率的提高有巨大的作用。