3.SUMO質(zhì)粒瞬時(shí)轉染

      （1） 將生長(cháng)狀態(tài)良好的細胞接種于直徑4-6cm的培養皿中，5% CO2，37℃培養箱內培養16-24h，細胞融合至60%-90%時(shí)可進(jìn)行轉染。

      （2） 轉染前1h將細胞培養液換成不含抗生素的培養液。

      （3） 用Opti-EME培養液稀釋4倍的Lipo2000試劑。

      （4） 用Opti-EME培養液稀釋SUMO質(zhì)粒。

      （5） 將上兩步溶液按1:1比例混合配成轉染復合液，室溫，孵育20min。

      （6） 將已接種細胞的培養皿中加入200ul轉染復合液，充分混勻。

      （7） 繼續培養4-6h，更換正常培養液。

      （8） 培養24-72h，鏡下觀(guān)察和檢測帶有熒光標記的SUMO質(zhì)粒的表達。