一、蛙或蟾蜍坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本的制備
1. 實(shí)驗原理 蛙或蟾蜍等兩棲類(lèi)動(dòng)物的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與溫血動(dòng)物相似,而其離體組織生活條件易于掌握,在任氏液的浸潤下,神經(jīng)肌肉標本可較長(cháng)時(shí)間保持生理活性,因此,在生理學(xué)實(shí)驗中常用蛙或蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌離體標本來(lái)觀(guān)察神經(jīng)肌肉的興奮性、興奮過(guò)程以及骨骼肌收縮特點(diǎn)等。
2. 實(shí)驗器材與藥品 蛙類(lèi)手術(shù)器械和藥品1套,包括:蛙板、小玻板各1塊,粗剪刀、直剪刀各1把,大鑷子、小鑷子各1把,眼科剪刀1把、探針1根、玻璃分針2根,大燒杯、小燒杯各1個(gè),滴管1支,培養皿1個(gè),棉線(xiàn),任氏液,鋅銅叉。
3. 實(shí)驗方法和步驟
(1)破壞腦脊髓:取蟾蜍一只,用自來(lái)水沖洗干凈。左手握住蟾蜍,用食指壓住頭部前端使頭前俯,右手持刺蛙針從枕骨大孔向前刺入顱腔(圖9-33),左右攪動(dòng)搗毀腦組織,然后將刺蛙針退到枕骨大孔,不拔出而是將其尖轉向后插入脊柱管中搗毀脊髓,插入椎管時(shí),蟾蜍后肢立即失去緊張性,多數情況出現尿失禁。若腦脊髓破壞完全,可見(jiàn)蟾蜍四肢松弛,呼吸消失。
(5)游離坐骨神經(jīng)和剪斷股骨:認清坐骨神經(jīng)溝和腓腸肌的部位,用剪刀剪斷梨狀肌及其周?chē)慕Y締組織,左手提著(zhù)神經(jīng)上的細線(xiàn),右手持剪刀或玻璃分針沿坐骨神經(jīng)溝細心剝離,直至將坐骨神經(jīng)剝離到腘窩。將游離干凈的坐骨神經(jīng)放在下腿上,沿膝關(guān)節的周?chē)鷮⒋笸鹊乃屑‰旒魯?,并用剪刀刮凈股骨下段附?zhù)的肌肉,在股骨上1/3處剪去上段股骨及所附的肌肉,這樣制成的稱(chēng)為坐骨神經(jīng)下腿標本。
二、離體蛙心標本的制備
1. 標本制備
(1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毀壞腦和脊髓,將其仰臥固定在蛙板上。從劍突下將胸部皮膚向上剪開(kāi)或剪掉,然后剪掉胸骨,打開(kāi)心包,暴露心臟和動(dòng)脈干。
(2)觀(guān)察心臟的解剖結構:在腹面可以看到一個(gè)心室,其上方有兩個(gè)心房,心室右上角連著(zhù)一個(gè)動(dòng)脈干,動(dòng)脈干根部膨大為動(dòng)脈圓錐,也稱(chēng)動(dòng)脈球。動(dòng)脈向上可分左右兩支。用玻璃針從動(dòng)脈干背部穿過(guò),將心臟翻向頭側,在心臟背面兩心房下面,可以看到顏色較紫紅的膨大部分,為靜脈竇,這是兩棲類(lèi)動(dòng)物心臟的起搏點(diǎn),觀(guān)察靜脈竇、心房、心室間收縮的先后關(guān)系。
三、離體主動(dòng)脈條
1. 制備方法 取兔或大鼠一只,猛擊其頭致死,立即剖開(kāi)胸腔,分離胸主動(dòng)脈,盡可能于近心臟處把其切斷,迅速置于盛有克氏液并通以95%氧氣及5%二氧化碳的培養皿中,剔除血管外結締組織及脂肪,洗去凝血塊,輕輕套在較主動(dòng)脈稍小的玻璃棒上。然后用眼科剪把主動(dòng)脈作螺旋形剪開(kāi),制成寬約3mm、長(cháng)1.5~2cm的主動(dòng)脈條,兩端分別用線(xiàn)結扎,置于盛有克氏液并通以95%氧氣及5%二氧化碳的恒溫37℃的麥氏浴管內,平穩90~120min后進(jìn)行實(shí)驗。也可把胸主動(dòng)脈剪成多個(gè)寬2mm的動(dòng)脈環(huán)代替血管條做實(shí)驗。
2. 注意事項
(1)本標本勿用手拿,應以鑷子夾取,且不可在空氣中暴露過(guò)久,以免失去敏感性。
四、離體氣管標本制備
1. 氣管連環(huán)標本 豚鼠1只,體重500g,用木槌擊斃,立即從腹面正中切開(kāi)皮膚和皮下組織,細心分離出氣管,自甲狀軟骨下剪下整段氣管,置于盛有Kerbs營(yíng)養溶液的平皿中,剪除氣管周?chē)M織。從軟骨環(huán)之間由前向后和由后向前進(jìn)行交叉橫切,均不完全切斷而保留一小段。從上到下約橫切10~15處。然后兩端縫上線(xiàn),一端固定,另一端拉開(kāi),即成氣管連環(huán)。
2. 氣管螺旋條標本 將氣管由一端向另一端螺旋形剪成條狀,每2~3個(gè)軟骨環(huán)剪一個(gè)螺旋。亦可用一根直徑2~3mm的玻璃棒或竹棒,將氣管套在其上,用剪刀剪成或用手術(shù)刀切成螺旋狀。整個(gè)螺旋長(cháng)條可作一只實(shí)驗標本,也可用半段螺旋條做一標本。
注意事項:分離氣管及制作氣管螺旋條標本時(shí),動(dòng)作要敏捷而輕柔,切勿用鑷子夾傷氣管平滑肌。
(本文轉載丁香通)