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| 技術(shù)類(lèi)型 | 技術(shù)原理 | 隨機插入現象 | 脫靶現象 | 馬賽克現象 |
| 傳統ES打靶技術(shù) | 大片段的同源重組 | 可以排除所有的隨機插入，所有隨機插入的克隆都可以被Southern Blot檢測到并排除 |
無(wú)脫靶風(fēng)險 因為同源重組技術(shù)是一個(gè)極度保守的技術(shù)，只有幾個(gè)堿基的差異就同源重組發(fā)生的概率就會(huì )大大下降 |
無(wú) 動(dòng)物由單一克隆發(fā)育而成，修飾的基因型一致 |
| TALEN技術(shù) |
KO：核酸酶定點(diǎn)切割 KI：核酸酶定點(diǎn)切割后產(chǎn)生DNA斷口，相對提高該位點(diǎn)的短片段同源重組效率 |
無(wú)法排除風(fēng)險 特別是在做KI的應用時(shí)候，線(xiàn)性化的DNA會(huì )產(chǎn)生較高概率的隨機插入 |
無(wú)法排除風(fēng)險 TALEN識別序列較短，獲得的動(dòng)物必須進(jìn)行脫靶效應的檢測 |
存在 如果核酸酶起作用不是在胚胎的單細胞階段，就會(huì )出現一個(gè)動(dòng)物有多種修飾基因型的現象 |
| CRISPR/Cas9技術(shù) |
KO :核酸酶定點(diǎn)切割 KI：核酸酶定點(diǎn)切割后產(chǎn)生DNA斷口，相對提高該位點(diǎn)的短片段同源重組效率 |
無(wú)法排除風(fēng)險 特別是在做KI的應用時(shí)候，線(xiàn)性化的DNA會(huì )產(chǎn)生較高概率的隨機插入 |
無(wú)法排除風(fēng)險 gRNA識別序列較短，獲得的動(dòng)物必須進(jìn)行脫靶效應的檢測 |
存在 如果核酸酶起作用不是在胚胎的單細胞階段，就會(huì )出現一個(gè)動(dòng)物有多種修飾基因型的現象 |
| TetraOneTM 技術(shù) | 大片段的同源重組 | 可以排除所有的隨機插入，所有隨機插入的克隆都可以被Southern Blot檢測到并排除 |
無(wú)脫靶風(fēng)險 因為同源重組技術(shù)是一個(gè)極度保守的技術(shù)，只有幾個(gè)堿基的差異就同源重組發(fā)生的概率就會(huì )大大下降 |
無(wú) 動(dòng)物由單一克隆發(fā)育而成，基因型一致 |
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