細胞雜交技術(shù)
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發(fā)布時(shí)間：2016-09-19
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動(dòng)物細胞融合也稱(chēng)細胞雜交 (cell hybridization)，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細胞融合成一個(gè)細胞的過(guò)程，融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細胞遺傳信息的單核細胞，稱(chēng)為雜交細胞(hybrid cell)基因型相同的細胞融合成的雜交細胞稱(chēng)為同核體(homokaryon);來(lái)自不同基因型的雜交細胞則稱(chēng)為異核體(heterokaryon)。
細胞 融合的具體步驟包括：
(1)細胞準備。分貼壁和懸浮細胞兩種。前者可直接將兩親本細胞混合培養 ，后者需制成一定濃度的細胞懸浮液。
(2)細胞融合，加促融因子于將行融合的細胞之中，誘導融合。
(3)雜種細胞選擇。利用選擇性培養基等，使親本細胞死亡，而讓雜種細胞存活。
(4)雜種細胞克隆。對選出的雜種細胞進(jìn)行克隆(選擇與純化)，經(jīng)過(guò)培養，就能獲得所需要的無(wú)性繁殖系。
細胞雜交
同種細胞在培養時(shí)2個(gè)靠在一起的細胞自發(fā)合并，稱(chēng)自發(fā)融合;異種間的細胞必須經(jīng)誘導劑處理才能融合，稱(chēng)誘發(fā)融合。
誘導細胞融合的方法有三種：生物方法(病毒)、化學(xué)方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(電激和激光)。某些病毒如：仙臺病毒、副流感病毒和新城雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein)，可介導病毒同宿主細胞融合，也可介導細胞與細胞的融合，因此可以用紫外線(xiàn)滅活的此類(lèi)病毒誘導細胞融合?；瘜W(xué)和物理方法可造成膜脂分子排列的改變，去掉作用因素之后，質(zhì)膜恢復原有的有序結構，在恢復過(guò)程中便可誘導相接觸的細胞發(fā)生融合。
細胞融合不僅可用于基礎研究，而且還有重要的應用價(jià)值，在植物育種方面已經(jīng)成功的有蘿卜+甘藍、粉藍煙草+郎氏煙草、番茄+馬鈴薯等等。
單克隆抗體技術(shù)是細胞雜交技術(shù)的成功應用(圖2-27)，正常淋巴細胞(如小鼠脾細胞)具有分泌抗體的能力，但不能在體外長(cháng)期培養，瘤細胞(如骨髓瘤)可以在體外長(cháng)期培養，但不分泌抗體。于是英國人Kohler和Milstein 1975將兩種細胞雜交而創(chuàng )立了單克隆抗體技術(shù)，獲1984年諾貝爾獎。
