實(shí)驗原理及技術(shù)背景1：

 原位雜交組化（ISHH）屬于分子雜交的一種，是一種應用標記探針與組織細胞中的待測核酸雜交，再應用標記物的檢測系統，在核酸原有的位置將其顯示出來(lái)的一種檢測技術(shù)。原位雜交的本質(zhì)就是在一定的溫度和離子濃度下，使其有特異序列的單鏈探針通過(guò)堿基互補配對規則與組織細胞內待測的核酸復性結合而使得組織細胞中的特異性核酸得到定位，并通過(guò)探針上所標記的檢測系統將其在核酸的原有位置上顯示出來(lái)。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補，所以不同來(lái)源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序（某種程度的同源性）就可以形成雜交雙鏈。探針的種類(lèi)按所帶標記物可分為同位素標記探針和非同位素標記探針兩大類(lèi)。目前，大多數放射性標記發(fā)是通過(guò)酶促反應將標記的核苷酸摻入DNA中，常用的同位術(shù)標記物有³H、³⁵S、¹²⁵I、³²P。同位素標記物雖然有靈敏性高、背景較為清晰等優(yōu)點(diǎn)，但是由于反射性核素對人和環(huán)境均會(huì )造成傷害，近年來(lái)有被非同位素取代的趨勢。非同位素標記物中目前最常用的有生物素、地高辛和熒光素三種。