目的：本規程旨在為微生物實(shí)驗室操作提供一個(gè)標準化規程;適用范圍：微生物實(shí)驗室;責任者：實(shí)驗室、微生物檢測員;定義：無(wú);安全注意事項：嚴格遵循無(wú)菌操作，防止微生物污染;操作人員進(jìn)入微生物實(shí)驗室應先關(guān)掉紫外燈。

        

     微生物實(shí)驗室標準化操作規程：
     1.微生物實(shí)驗室應設有無(wú)菌操作間和緩沖間，無(wú)菌操作間潔凈度應達到10000級，室內溫度保持在20～24℃，濕度保持在45～60%，超凈臺潔凈度應達到100級。
     2.微生物實(shí)驗室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。
     3.嚴防一切滅菌器材和培養基污染，已污染者應停止使用。
     4.微生物實(shí)驗室應備有工作濃度的消毒液(75％的酒精)。
     5.微生物實(shí)驗室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證微生物實(shí)驗室的潔凈度符合要求。
     6.需要帶入微生物實(shí)驗室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經(jīng)過(guò)適宜的方法滅菌。
     7.工作人員進(jìn)入微生物實(shí)驗室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專(zhuān)用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入微生物實(shí)驗室進(jìn)行操作。
     8.微生物實(shí)驗室使用前必須打開(kāi)微生物實(shí)驗室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上，并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應及時(shí)清理微生物實(shí)驗室，再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。
     9.供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開(kāi)啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。
     10.每次操作過(guò)程中，均應做空白對照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
     11.吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。
     12.接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物。
     13.帶有菌液的吸管，試管，培養皿于高壓蒸汽滅菌鍋121℃保持20min后取出清洗。
     14.如有菌液灑在桌上或地上，應立即用75%酒精溶液覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí)，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。
     15.凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。
     16.微生物實(shí)驗室應每月檢查菌落數。在超凈工作臺開(kāi)啟的狀態(tài)下，取內徑90mm的無(wú)菌培養皿若干，無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營(yíng)養瓊脂培養基約15mL，放至凝固后，倒置于30～35℃培養箱培養48小時(shí)，證明無(wú)菌后，取平板3～5個(gè)，分別放置工作位置的左中右等處，開(kāi)蓋暴露30分鐘后，倒置于30～35℃培養箱培養48小時(shí)，取出檢查。100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過(guò)1個(gè)菌落，10000級潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落。如超過(guò)限度，應對微生物實(shí)驗室進(jìn)行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。