目的:利用程序化冷凍的方法,探究冷凍前、后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中Hba-α蛋白的分布和差異表達的變化,為今后開(kāi)發(fā)和利用新型哺乳動(dòng)物源抗凍蛋白提供理論依據。
方法:從妊娠d5小鼠體內獲取孵化囊胚;從小鼠延遲著(zhù)床模型獲取休眠胚胎,利用Confocal顯微鏡和Western Blot技術(shù)對程序化冷凍前、后的各組胚胎進(jìn)行Hba-α蛋白的分布和表達檢測。
結果:孵化囊胚和休眠胚胎在程序化冷凍前、后均有Hba-α蛋白的表達;孵化囊胚經(jīng)程序化冷凍后Hba-α蛋白的表達與冷凍前相比差異無(wú)顯著(zhù)性(P>0.05);冷凍前休眠胚胎與程序化冷凍前后的孵化囊胚相比,Hba-α蛋白的表達量顯著(zhù)下調(P<0.05);冷凍后休眠胚胎Hba-α蛋白的表達量顯著(zhù)低于其他各組(P<0.05)。
結論:程序化冷凍處理對小鼠休眠胚胎Hba-α蛋白的表達影響明顯大于孵化囊胚;Hba-α基因具有作為新型哺乳動(dòng)物源抗凍蛋白的潛力。