目的:優(yōu)化刺激THP-1細胞向M1、M2巨噬細胞和DC細胞定向分化的方法,為研究M1、M2和DC的三種體外細胞模型奠定基礎。
方法:首先使用PMA和GM-CSF/M-CSF刺激THP-1細胞的分化,然后添加不同的細胞因子誘導分化為M1、M2、DC細胞,流式細胞儀用于觀(guān)察細胞形態(tài)的變化,檢測細胞表面分子的表達。
結果:兩種刺激CD分子在細胞中表達的方法的總體趨勢基本相同。 THP-1-M1細胞表面CD80和CD86的表達顯著(zhù)增加,THP-1-M2細胞高表達CD163和CD209,而THP-1-DC細胞則顯著(zhù)降低CD14表達。它在CD80,CD86和CD11c中得到了高度表達。在PMA刺激后,M1、M2和DC細胞均粘附生長(cháng);在GM-CSF/M-CSF刺激后,僅一些DC細胞粘附在壁上,而M1和M2細胞仍然懸浮。它在懸浮中生長(cháng)。
結論:兩種方法均可成功誘導THP-1細胞分化為不同的亞型,但誘導的細胞具有不同的形態(tài)。刺激方法可以根據實(shí)驗需要選擇。