介紹：前交叉韌帶（ACL）是最常見(jiàn)的韌帶損傷。在過(guò)去的幾十年中，由于膝關(guān)節鏡和肌腱移植手術(shù)的領(lǐng)域取得了相當大的改進(jìn)，前交叉韌帶斷裂的管理也基本上是從非手術(shù)治療到使用肌腱移植重建前交叉韌帶。前交叉韌帶置換的成功率取決于骨隧道愈合及軟組織移植骨；為了實(shí)現膝關(guān)節的穩定性，讓患者進(jìn)行體育活動(dòng)這一方面是所必需的。雖然手術(shù)技術(shù)和治療不斷進(jìn)步，重要的挑戰仍然是關(guān)于A(yíng)CL更換移植后的愈合過(guò)程。加快促進(jìn)肌腱合并潛在的手段是結合使用生長(cháng)因子或干細胞療法。

　　方法：新西蘭兔：選用61只雄性新西蘭兔，動(dòng)物3個(gè)月大，體重2-2.5公斤。微生物學(xué)檢查證實(shí)這些兔無(wú)特定病原體（SPF）和無(wú)病毒抗體。兔實(shí)驗前至少有48h的適應期。手術(shù)和術(shù)后維護符合實(shí)驗動(dòng)物倫理委員會(huì )指令。實(shí)驗過(guò)程中，一個(gè)封閉的系統維持保護動(dòng)物微生物狀況。動(dòng)物放置在單獨、不分層、不銹鋼籠具使兔進(jìn)行視覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)和嗅覺(jué)適應，減少應激。動(dòng)物籠子每周清洗三次，按照最佳的籠具清潔建議。所有家兔均暴露于12:12明/暗周期。動(dòng)物設施室溫維持在17°C至21°C，相對濕度在55%至50%之間。所有動(dòng)物自由采食自動(dòng)飲食。

　　外科手術(shù)的人員和材料：本操作包括三類(lèi)人 （研究員、動(dòng)物外科醫生、技術(shù)人員）。在誘導室團隊成員手術(shù)前準備動(dòng)物、使用麻醉劑和在手術(shù)過(guò)程中把無(wú)菌手術(shù)器械交給團隊的其他成員。在無(wú)菌區內兩個(gè)團隊成員準備了所需的所有材料，并開(kāi)展手術(shù)。過(guò)程：一個(gè)成員準備的同種異體肌腱，而另一個(gè)準備手術(shù)部位。

　　麻醉與術(shù)前準備：兔在全身麻醉情況下進(jìn)行前交叉韌帶重建術(shù)，按次序給藥，分別為抗焦慮、肌松藥和鎮靜藥。這種方法減輕了動(dòng)物靜脈麻醉給藥的應激。新西蘭兔麻醉通過(guò)肌肉注射（IM）注射抗焦慮藥（地西泮（0.5毫克/公斤）），肌松藥（鹽酸美托咪啶（290μg/kg）和鎮靜藥，氯胺酮500（50 mg/kg））確保適度的深度鎮靜平衡。維持自然通風(fēng)，避免氣管插管的發(fā)病率（包括外傷性插管、外傷性拔管、氣胸或肺炎）平均手術(shù)時(shí)間為40分鐘。在一個(gè)平靜，安靜，和非緊張的環(huán)境下進(jìn)行動(dòng)物誘導麻醉。在手術(shù)部位對側肌肉注射麻醉，應用抗生素預防感染，手術(shù)部位使用無(wú)菌單來(lái)保證無(wú)菌，暴露動(dòng)物的胸部使動(dòng)物呼吸速率直接可視。每只兔的右膝蓋去除被毛后，用無(wú)酒精碘伏擦拭消毒。

　　手術(shù)技術(shù)：在無(wú)菌條件下進(jìn)行前交叉韌帶重建。每只兔子都位于仰臥位，蓋上無(wú)菌單，僅暴露右膝。為了無(wú)菌，腳被包裹。在膝關(guān)節正中處做一切口，獲取右趾伸肌長(cháng)肌腱（EDL）。取出后，EDL移植物被浸泡在PBS中，室溫保持在約15分鐘。在兔腿內側髕骨關(guān)節旁操作，而膝蓋骨向外脫位。這條腿極度屈曲暴露ACL，前交叉韌帶（ACL）切除后，脛骨和股骨骨隧道的建立是為了在該部位移植ACL。建立骨隧道，在前交叉韌帶的插入點(diǎn)穿孔（2毫米直徑）。特別注意的股骨骨隧道。當一個(gè)手術(shù)組的成員在鉆骨隧道，另一名成員正在準備同種異體移植。同種異體移植物張力下縫合，使用非吸收性3.0聚丙烯縫到膝關(guān)節伸直后的骨膜上。

　　術(shù)后動(dòng)物護理和標本采集：鎮痛是使用美洛昔康（0.02毫克/公斤）持續24小時(shí)。手術(shù)后的膝蓋用彈性繃帶進(jìn)行為期5天的固定。術(shù)后2天，所有兔均被允許自由活動(dòng)并恢復正?；顒?dòng)。這些動(dòng)物每天進(jìn)行一般檢查，檢測任何疼痛的臨床癥狀和其他并發(fā)癥，如神經(jīng)性厭食癥，不正常的哭泣，活動(dòng)減少，和腿部包扎問(wèn)題。

　　對于標本采集，在3和6周時(shí)如先前描述，全身誘導麻醉每一只兔子。在充分麻醉后處死動(dòng)物，用約5毫升混合物（含1克戊巴比妥鈉，52毫克和0.05毫克的苯甲醇、胭脂紅）心內注射。通過(guò)呼吸停止、心音缺失和反射消失來(lái)確認動(dòng)物死亡。

　　成像： 64層骨關(guān)節CT被用來(lái)作兔膝關(guān)節移植圖像。分辨率為0.3×0.6 mm2。在兩個(gè)手術(shù)的膝關(guān)節腔注射碘同對側非手術(shù)的膝蓋對照，相對于天然ACL，確認手術(shù)進(jìn)行適當的初始放置，兔安樂(lè )死后2小時(shí)內進(jìn)行成像。

　　結果：外科手術(shù)：沒(méi)有因為使用麻醉劑，出現動(dòng)物死亡情況。此外，麻醉后兔沒(méi)有出現呼吸和心跳異常的情況。在"方法"部分中描述的所有藥物劑量是適合動(dòng)物的大小，重量和類(lèi)型；各自的用藥效果持續約40分鐘。手術(shù)過(guò)程中沒(méi)有早醒的動(dòng)物。整個(gè)外科手術(shù)持續了約40分鐘，這一時(shí)間段提供了充足的時(shí)間用于誘導麻醉，手術(shù)，包扎傷口，隨后轉移到他們的各自籠中。

　　術(shù)后護理: 所有的兔子的耐受性良好，并沒(méi)有表現出術(shù)后感染的跡象。動(dòng)物術(shù)后2天內恢復到正?；顒?dòng)。研究過(guò)程中沒(méi)有疼痛的跡象，傷口感染或異常行為。在去毛的腿上，切口部位的評估和定位是很容易做的。所有的兔子都不需要第二次敷料或長(cháng)期的固定。術(shù)后約5天內動(dòng)物體重下降，體重曲線(xiàn)進(jìn)行歸一化處理，并在3個(gè)星期，所有的兔子超過(guò)各自術(shù)前體重。在6周時(shí)，平均體重增加平均為550克，體重增加約為19%。在手術(shù)后4周內，兔子有明顯的跛行，但恢復良好，并有一個(gè)勻稱(chēng)的跳躍。

　　成像：關(guān)節的CT影像分析提供了關(guān)于在膝關(guān)節移植手術(shù)插入的證據。相對于脛骨和股骨軸植入定位相似，在矢狀斷面的ACL如圖。

　　大體解剖：術(shù)后3周和6周，膝關(guān)節切開(kāi)術(shù)評估植入物的質(zhì)量與整合。

　　討論：本文密切模仿人類(lèi)進(jìn)行前交叉韌帶修復手術(shù)。新西蘭白兔成為研究ACL手術(shù)提供優(yōu)良高性?xún)r(jià)比動(dòng)物模型。在本研究中成功地操作所描述的手術(shù)和麻醉程序，不需要插管和通風(fēng)。在技術(shù)具有挑戰性的過(guò)程中兔子仍然充分鎮靜；

　　結論：新西蘭白兔為研究ACL手術(shù)提供了一個(gè)極好的模型。