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牛皰疹病毒I型(BHV-1)熒光定量PCR檢測?方法的建立及應用

  目的 建立牛皰疹病毒I型(BHV-1)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法,用于牛源性樣本中BHV-1的快速檢測。

  方法 根據已發(fā)表的BHV-1gB基因設計特異引物和TaqMan探針,建立BHV-1實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。并對方法的特異性、敏感性、重復性穩定性等進(jìn)行測定。用建立的方法對181份牛源性樣本進(jìn)行檢測。

  結果 建立的BHV-1熒光定量PCR檢測方法與牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV3)、牛病毒性腹瀉病毒1型(BVDV1)、豬偽狂犬病毒(PRV)、單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV-1)、貓瘤疹病毒1型(FHV-1)均無(wú)交叉反應;檢測靈敏度可達到1x101copies/μL∶批內變異系數均小于5%。應用建立的方法檢測181份牛源性樣本,有6份樣本BHV-1核酸為陽(yáng)性。

  結論 建立的BHV-1熒光定量PCR檢測方法具有快速、特異、敏感及穩定的特點(diǎn),可用于牛源性樣本中BHV-1污染的檢測。

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