簡(jiǎn)介：慢性非細菌性前列腺炎（CAP）或慢性盆腔疼痛綜合征（CPPS）是臨床上最常見(jiàn)的前列腺炎類(lèi)型，占90%以上，是泌尿外科常見(jiàn)疾病。指前列腺的炎癥狀態(tài)。發(fā)病率約為3-16%。美國國立衛生研究院（NIH）將前列腺炎分為4類(lèi)，包括急性和慢性細菌性前列腺炎（I型和II型）、慢性前列腺炎（III型）和無(wú)癥狀前列腺炎（IV型）。其中，慢性非細菌性前列腺炎（CNP）或慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛綜合征（CP/CPPS）最常見(jiàn)，約占90%。根據前列腺樣本中是否存在白細胞浸潤，CP/CPPS進(jìn)一步分為IIIA和IIIB。CNP的病因、發(fā)病機制和病理生理學(xué)目前是多種多樣的。一些研究表明，發(fā)病率可能與不明微生物感染、自身免疫異常、氧化應激、內分泌紊亂、神經(jīng)紊亂和社會(huì )心理學(xué)有關(guān)。組織學(xué)上，前列腺炎的特征是多核和單核細胞浸潤（中性粒細胞、淋巴細胞、巨噬細胞和漿細胞）在腺泡或導管周?chē)拈g質(zhì)結締組織中。典型臨床表現為尿頻、尿急、排尿困難、排尿、排尿或大便后排尿等異常，全身疼痛（腰骶、下腹痛、會(huì )陰、睪丸、大腿內側等）嚴重者可影響正常性功能。慢性非細菌性前列腺炎對患者生活質(zhì)量影響較大。人類(lèi)和嚙齒動(dòng)物的前列腺在解剖學(xué)上是完全不同的。為了更好地理解CAP，一個(gè)好的動(dòng)物模型是必不可少的。目前，許多人類(lèi)非癌癥疾病都有適當的動(dòng)物模型，作為獲得研究數據和測試治療策略的來(lái)源。CP動(dòng)物模型的評價(jià)標準由于建模方法的不同，會(huì )有不同的檢測方法和評價(jià)標準。

　　動(dòng)物模型：建立良好的動(dòng)物模型的第一步是成功地研究前列腺炎的發(fā)病機制。目前尚無(wú)公認的動(dòng)物模型前列腺炎免疫標準方法。國內外許多研究者將嚙齒類(lèi)動(dòng)物用作實(shí)驗動(dòng)物，包括Wistar大鼠、SD大鼠、lewis大鼠、C57BL/6小鼠和NOD小鼠。不同的動(dòng)物種類(lèi)有不同的建模方法。

　　實(shí)驗性自身免疫性前列腺炎（EAP）模型:EAP大鼠模型:目前，EAP動(dòng)物模型的制作尚無(wú)公認的標準方法。國內外許多研究人員都將大鼠作為實(shí)驗動(dòng)物。這一模型是由Pacheco-Pruil等人提供,利用Wistar大鼠性腺純化蛋白，將完全弗氏佐劑（CFA）注入同一大鼠皮下組織，誘導自身免疫。結果發(fā)現，8只大鼠中有3只（38%）在接受單次MAG接種后第21天出現促炎反應，重復檢測同一種大鼠，20只大鼠中有9只（45%）在30天后出現前列腺癥狀。這種經(jīng)典的建模方法一直沿用至今。然而，這種方法的成功有許多限制。目前國內外文獻報道，炎癥的嚴重程度不僅與蛋白純化液的濃度有關(guān)，還與注射的時(shí)間、地點(diǎn)和劑量有關(guān)。一般注射時(shí)間為0、15和30天。在大鼠的足底、腹股溝和子宮頸共進(jìn)行了5次皮下注射。蛋白純化液濃度過(guò)高，可能導致大鼠死亡；如果濃度太低，就不足以引起自身免疫。一些人使用不同濃度的前蛋白純化液評價(jià)劑量-效應關(guān)系，發(fā)現最佳注射量為40-60 mg/ml。Donadio等人發(fā)現前列腺酸性磷酸酶（PAP）也可能是誘發(fā)自身免疫性前列腺炎的主要抗原。用重組大鼠或人PAP免疫大鼠4周，在大鼠模型中發(fā)現體液免疫，未見(jiàn)細胞毒性T細胞反應（CTL）和組織變化。然而，在哥本哈根大鼠靜脈注射重組表達人PAP的疫苗后，可以產(chǎn)生CTL應答和組織特異性前列腺炎，但沒(méi)有觀(guān)察到PAP的特異性抗體。提示PAP是否誘導細胞或體液免疫反應可能與大鼠的類(lèi)型有關(guān)。此外，在Wistar大鼠中，來(lái)自同基因EAP大鼠模型的脾臟單核細胞也可用于誘導前列腺中的炎癥反應。在EAP模型中，引起大鼠前列腺炎自身免疫的主要抗原物質(zhì)是前列腺類(lèi)固醇結合蛋白（psbp），它能引起細胞免疫和體液免疫。研究發(fā)現單核細胞在第一次注射后7天開(kāi)始浸潤。此后，數量迅速增加，在第28天達到最大值。浸潤的單核細胞主要集中在前列腺間質(zhì)空間，伴有出血和部分組織纖維化，同時(shí)出現肥大細胞時(shí)，出現炎癥。浸潤細胞主要為CD4+T細胞和CD8+T細胞，少量巨噬細胞。

　　EAP小鼠模型：Keetch等人提出了建立EAP的第一個(gè)小鼠模型。用CFA將同種小鼠腹側前列腺葉提取物按最大劑量為0.75 mg并輔以百日咳毒素接種C57BL/6小鼠結果發(fā)現，C57BL/6小鼠100%發(fā)生前列腺炎，炎癥范圍廣泛，集中在前列腺背面，炎癥程度與劑量大小有關(guān)。不同種類(lèi)的SJL和A/Jj小鼠的結果不令人滿(mǎn)意結果發(fā)現，SJL和A/J小鼠可產(chǎn)生一定程度的炎癥。免疫30天后發(fā)現單核細胞浸潤和炎癥。該部位集中在間質(zhì)和血管附近。研究表明，與其他種類(lèi)的小鼠相比，用C57BL/6小鼠建立EAP模型的成功率較高。Zhou等人利用從前列腺中提取的T2肽（從前列腺中的TRPM8中提?。┙⒘薈P/CPP模型。使用T2+CFA+AL(OH)3.注射。第1天、第14天和第28天皮下給實(shí)驗組給藥（1 ml）。以前成功的CP/CPP模型主要通過(guò)增強前列腺中T細胞的積累和抗體識別前列腺抗原。在該模型中，觀(guān)察到實(shí)驗大鼠T細胞增強、巨噬細胞向前列腺基質(zhì)和腺上皮浸潤，這表明CP/CPPS模型的建立是成功的。此外，CP/CPPS患者精液精液中發(fā)現較高水平的促炎細胞因子（IL-1β和TNF-A）和非特異性炎癥標記物（CRP）。在這個(gè)模型中，T2+CFA+ Al（OH）3組的TNF-α和IL-β水平顯著(zhù)增加，同時(shí)CRP含量也增加，使其成為CP/CPPS的有效模型。由此得出結論：用T2+CFA+Al（OH）3佐劑免疫組的炎癥較其他組嚴重,T2+CFA+Al（OH）3佐劑混合可誘導實(shí)驗性自身免疫性前列腺炎（EAP），發(fā)病率100%。Rivero等人利用NOD小鼠建立EAP模型。他們還將MAG勻漿與CFA混合，在多個(gè)部位皮下注射。結果表明，NOD小鼠在接種后第10天和第20天出現明顯的前列腺炎癥反應。炎性浸潤的程度很大，前列腺側頁(yè)、背頁(yè)、精囊和凝固腺可見(jiàn)中度和重度炎性病變。不僅發(fā)現了體液免疫反應，而且發(fā)現了炎癥反應中的細胞免疫反應。在同一組中進(jìn)行了進(jìn)一步的實(shí)驗，結果表明，注射1.0 mg的Wistar大鼠MAG或30 mg的Wistar大鼠PSBP兩次可誘導80-100%的年輕雄性NOD小鼠發(fā)生前列腺炎，但C57BL/6小鼠只有30%發(fā)生炎癥。接種MAG的小鼠比接種psbp的小鼠出現水腫更多?？傊?，自身免疫建模方法可能不適合于每一種嚙齒動(dòng)物。選擇Wistar大鼠建立EAP模型，主要是由于前列腺炎的自發(fā)、年齡依賴(lài)性和組織病理學(xué)變化，在許多方面與人類(lèi)慢性前列腺炎非常相似。當注射的前列腺蛋白純化液濃度為40-60 mg/ml時(shí)，建模成功率可達38%。選擇NOD小鼠建立EAP模型，主要是因為它們比C57BL/6小鼠和Wistar大鼠更敏感，模型成功率為100%。證實(shí)了nod小鼠適合EAP模型的建立?？偟膩?lái)說(shuō)，與EAP大鼠模型相比，NOD小鼠模型的優(yōu)勢在于，小鼠物種容易獲得且易于培養，適合需要大樣本數據的實(shí)驗，并且有幾種免疫技術(shù)可用于研究前列腺炎。由于其免疫特性，許多研究者傾向于選擇小鼠EAP模型來(lái)研究前列腺炎的機制和治療。主要缺點(diǎn)是誘導自身免疫性前列腺炎的組織自身抗原尚不清楚，NOD小鼠可自發(fā)發(fā)展糖尿病，從而干擾前列腺炎。

　　年齡相關(guān)性前列腺炎模型：大鼠前列腺炎模型：年齡相關(guān)性自發(fā)性前列腺炎是研究自身免疫性前列腺炎的常用模型。以往的研究表明，不同種族的大鼠在達到一定年齡時(shí)，會(huì )自發(fā)發(fā)生非細菌性前列腺炎。自發(fā)性前列腺炎有中度單核細胞浸潤，主要為CD4+T細胞，炎癥主要發(fā)生在前列腺間質(zhì)、腺泡周?chē)蛡热~。研究發(fā)現，這些大鼠對自身前列腺抗原的耐受機制存在缺陷，隨著(zhù)年齡的增長(cháng)和身體環(huán)境的變化，耐受機制可能進(jìn)一步減弱，導致與年齡相關(guān)的自發(fā)性自身免疫性前列腺炎。不同類(lèi)型大鼠發(fā)生自發(fā)性自身免疫性前列腺炎的概率不同。Vykhovanets等人發(fā)現60-70%的雄性L(fǎng)ewis大鼠在大約12周時(shí)在前列腺的外葉發(fā)生自發(fā)炎癥；22-24周時(shí)的SD大鼠有腹部和外側前列腺。炎癥發(fā)生率較低（約16%），老年Wistar大鼠自發(fā)性CNP發(fā)生率為27%；哥本哈根大鼠20周時(shí)發(fā)生自發(fā)性側葉前列腺炎的比例為88%。

　　小鼠前列腺炎模型：小鼠發(fā)生自發(fā)性前列腺炎的可能性很小，但在20世紀90年代末，研究人員發(fā)現，老年NOD小鼠不僅在胰腺、甲狀腺、甲狀旁腺和腎上腺中自發(fā)發(fā)生自身免疫，而且在前列腺中也會(huì )發(fā)生自身免疫。它能產(chǎn)生自發(fā)的自身免疫。Jackson等人結果發(fā)現，NOD雄性小鼠在20周時(shí)可能發(fā)生自發(fā)性自身免疫性前列腺炎，并保持穩定。該NOD小鼠患有I型胰島素依賴(lài)性糖尿病。前列腺白細胞抗原在20-30周的雄性小鼠中比8周大的小鼠多2-4倍。到40周時(shí)，70%的NOD小鼠會(huì )發(fā)生前列腺炎反應，同時(shí)存在細胞免疫和體液免疫。然而，8周大的nod小鼠對前列腺沒(méi)有任何細胞和體液免疫反應。研究表明，以IgG2b為主要成分的老年雄性結瘤小鼠血清中可出現抗前列腺抗原IgG抗體的高效價(jià)。已鑒定的前列腺抗原主要是psbp。老年雄性NOD小鼠自身免疫性前列腺炎的發(fā)生可能與機體對前列腺抗原的抵抗隨著(zhù)年齡的增長(cháng)而逐漸下降有關(guān)，最終導致自發(fā)性自身免疫性前列腺炎的發(fā)生。另一項研究發(fā)現，昆明小鼠也可以通過(guò)長(cháng)期被動(dòng)禁欲來(lái)發(fā)展自發(fā)性自身免疫性前列腺炎。以往的研究表明，某些種類(lèi)的大鼠在達到一定年齡后會(huì )自發(fā)發(fā)生非細菌性前列腺炎。該模型的建立與大鼠和小鼠的類(lèi)型和年齡有關(guān)。Lewis、Wistar和Copenhagn大鼠和NOD雄性小鼠隨著(zhù)年齡的增長(cháng)而發(fā)展為自身免疫性前列腺炎的研究提供了很好的模型。該模型具有良好的穩定性和長(cháng)期維護性。其病理形態(tài)與臨床表現相似。適用于人CP治療藥物的研究，病理特異性好。然而，建模時(shí)間超過(guò)3個(gè)月，相對較長(cháng)且成本較高，重復性不理想，因此使用較少。如果是人類(lèi)慢性前列腺炎的研究，最好以哥本哈根大鼠為模型動(dòng)物，20周模型成功率可達88%。

　　激素和去勢誘導前列腺炎模型：大鼠前列腺炎模型：眾所周知，前列腺是一個(gè)依賴(lài)雄性激素的器官。雄激素在調節前列腺的生長(cháng)、功能和疾病中起著(zhù)關(guān)鍵作用。該模型使用雌激素和去勢方法，導致異常激素水平和破壞動(dòng)物體內的雄激素平衡，導致對前列腺的非細菌炎癥反應。一些研究者用17β-雌二醇聯(lián)合卵巢切除術(shù)對大鼠進(jìn)行了模擬，結果表明，三種不同濃度的雌二醇組均能成功誘導前列腺炎炎癥改變。此外，還發(fā)現100μg 17β-雌二醇治療Wistar大鼠2-5天也可成功發(fā)展為前列腺炎。十一酸睪酮膠囊（2.0 mg/d）治療10周后，10-12周大的新生大鼠出現嚴重前列腺炎。通過(guò)觀(guān)察，在受影響的前列腺小葉的兩個(gè)前列腺腺中發(fā)現嚴重的水腫和淋巴細胞、單核細胞浸潤和廣泛的纖維化。這表明該方法是100%成功的。

　　小鼠前列腺炎模型：Pakarainen等人發(fā)現67%的睪酮治療的LH受體缺失的LuR-KO小鼠表現出顯著(zhù)的前列腺炎，其特征是在前列腺間質(zhì)和間質(zhì)組織之間存在大量淋巴細胞。第21天，8周的睪酮替代療法開(kāi)始恢復lur-ko雄性小鼠的性腺功能和附屬器官功能。芳香化酶過(guò)表達（AROM+）可導致小鼠內源性雌激素水平升高。AROM+小鼠在前列腺開(kāi)始時(shí)是正常的。隨著(zhù)雌激素水平的升高，肥大細胞、巨噬細胞逐漸出現在前列腺中，炎癥表現主要為粒細胞和T淋巴細胞浸潤。雌激素誘導的CNP模型簡(jiǎn)單，大鼠品種易得，模型試劑易得，模型成本低。病理變化與老年大鼠自發(fā)CNP相似。年齡依賴(lài)性自發(fā)性大鼠CNP在病理上與人CP相似，因此這種大鼠模型非常適合人CP治療藥物的研究，病理特異性較好。從缺點(diǎn)的角度看，雌激素聯(lián)合去勢方式對無(wú)菌技術(shù)和復雜手術(shù)有較高的要求。

　　化學(xué)性前列腺炎模型：化學(xué)物質(zhì)直接注射到動(dòng)物的前列腺中，導致無(wú)菌性CP。目前使用的化學(xué)物質(zhì)包括甘油，2%瓊脂、甲醛巴豆油，FCA等。其中，角叉菜膠制劑是最常用的，對前列腺組織損傷小，建模更類(lèi)似于慢性炎癥。Radhakrishnan和Nallu采用SD大鼠前列腺內注射3%角叉菜膠構建CNP模型，并在熱刺激和機械刺激期間測試其降低會(huì )陰疼痛閾值的程度。他們發(fā)現模型大鼠的炎癥細胞主要是單核細胞和淋巴細胞，纖維結締組織增生，間質(zhì)充血，水腫和其他慢性炎癥?；瘜W(xué)建模方法是將化學(xué)物質(zhì)直接注射到前列腺中引起炎癥，從而不可避免地對前列腺組織造成很大的損傷，該模型模擬了前列腺炎的發(fā)病機制。急性前列腺炎與慢性胰腺炎有一定的差異。

　　模型評價(jià)指標：由于模型方法的不同，CP動(dòng)物模型的評價(jià)標準會(huì )有不同的檢測方法和評價(jià)標準。然而，絕大多數評價(jià)標準都是基于這些方面：組織學(xué)、形態(tài)學(xué)、前列腺指數、尿動(dòng)力學(xué)、炎癥因素和疼痛。

　　病理學(xué)指標.I型指標（核心指標）：CP最直接的指標是前列腺組織的明顯炎癥。病理觀(guān)察能準確確定前列腺炎的嚴重程度，用光學(xué)顯微鏡觀(guān)察炎癥細胞是否浸潤，炎癥細胞是什么樣的，有無(wú)組織水腫、腺上皮壞死、脫落、腺上皮消失。病理分級如下：“0”表示前列腺大部分處于靜止狀態(tài)，腺體萎縮，腺上皮起皺。腺腔無(wú)分泌物，腺腔明顯縮小?！癐”表示前列腺中的大多數腺體處于擴張狀態(tài)。腺腔內有分泌物，但分泌物很少，周?chē)梢?jiàn)少量炎性細胞?！癐I”表示前列腺呈明顯擴張狀態(tài)，腺上皮變薄變平，腺腔充滿(mǎn)紅色分泌物?！癐II”表示前列腺處于顯著(zhù)擴張狀態(tài)，腺體擴大1-3倍。腺上皮扁平，腺腔充滿(mǎn)大量紅色分泌物。腺腔明顯擴張，散布在炎性細胞周?chē)?。根據上述評分標準，由兩人隨機對每個(gè)前列腺病理切片進(jìn)行評分。

　　生化指標（直接相關(guān)指標）：CP的直接指標是前列腺液或其勻漿中白細胞顯著(zhù)升高，卵磷脂體分布減少。根據前列腺炎免疫因子，經(jīng)常檢測前列腺勻漿中的IgG、IgA和IgM，成功建立模型后，IgA水平顯著(zhù)升高。根據神經(jīng)內分泌理論，前列腺炎會(huì )引起疼痛和前列腺液分泌過(guò)多。前列腺勻漿中的NE、PG、組胺、5-HT和NGF水平增加了IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α和IL-1β的水平。根據免疫學(xué)理論，當模型成功復制時(shí)，血清T或前列腺組織勻漿降低了T水平、E2水平、血清前列腺特異性抗原（PSA）水平和C反應蛋白（CRP）水平。

　　表觀(guān)指數，尿量指數，疼痛指數：明顯的指標包括動(dòng)物的前列腺指數、排尿量、飲水量和開(kāi)放活動(dòng)。模型制備成功后，前列腺濕重和前列腺指數增加，尿量減少，飲水量減少，開(kāi)放活動(dòng)減少，頭發(fā)光澤降低。前列腺炎可引起尿動(dòng)力學(xué)改變。前列腺炎動(dòng)物膀胱壓力、排尿間隔時(shí)間、最大尿壓力等尿動(dòng)力學(xué)參數可直接反映前列腺炎的情況。

　　結論：慢性前列腺炎病因復雜，病理生理過(guò)程尚未闡明，臨床治療非常困難。為了更好地了解自身免疫性前列腺炎的發(fā)病機制，找到正確的診斷和治療方法，建立有效的動(dòng)物模型尤為重要。在實(shí)際應用中，可結合實(shí)驗目的和顯示條件選擇合適的測試方法。上述方法仍有許多不足之處。因此，我們需要不斷探索更適合前列腺炎病因、發(fā)病機制和臨床表現的模型。