目的： 探究樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞的增殖特性，建立人輪狀G1P[8]型病毒體外感染樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞模型。

　　方法： 采用膠原酶XI和中性蛋白酶I聯(lián)合消化法獲取樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞，經(jīng)純化和鑒定，用人輪狀G1P[8]型病毒感染細胞，測定培養上清的病毒滴度和載量，并用Western blot和間接免疫熒光檢測法檢測人輪狀病毒G1P[8]型VP6蛋白的表達情況，評價(jià)人輪狀G1P[8]型病毒體外對樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞的感染性。

　　結果： 分離的樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞經(jīng)傳代培養純化，獲得純度達90%樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞。對樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞、原代腎細胞、HCT116細胞和MA104細胞進(jìn)行輪狀病毒易感性比較，確定樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞可以被人輪狀病毒G1P[8]感染，培養72 h時(shí)病毒滴度可達到2.0×105 TCID50/mL。經(jīng)Western blot和間接免疫熒光發(fā)現在人輪狀G1P[8]型病毒感染樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞1~5 d均能檢測到人輪狀病毒VP6蛋白的表達和分布。

　　結論： 確立了樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞的分離、純化與培養方法，并建立了人輪狀G1P[8]型病毒感染樹(shù)鼩原代小腸上皮細胞的體外模型。