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鼻咽癌轉移動(dòng)物模型

  針對鼻咽癌易出現淋巴結、肝、肺、骨轉移的情況,建立鼻咽癌轉移動(dòng)物模型是鼻咽癌研究的重要途徑之一。

  【造模機制】利用動(dòng)物體內傳代的方法,篩選出具有高轉移性的鼻咽癌轉移瘤細胞亞株,接種于裸小鼠或家兔皮下或鼻咽部,觀(guān)察鼻咽癌瘤細胞的轉移特性。

  【造模方法】

  1.裸小鼠淋巴結轉移動(dòng)物模型  篩選鼻咽癌細胞株(如5-8F-EGFP),5%CO2,37℃飽和濕度下,常規培養于10%FCS-RPMI1640培養基中,細胞密度達到80%時(shí),用0.25%胰酶消化,顯微鏡下計數,制成1×10000000/ml細胞懸液。選6~8周裸小鼠,尾根部皮下(或免疫功能低下部位)注射0.1ml。每天觀(guān)察腫瘤生長(cháng)情況。待裸鼠出現惡病質(zhì)時(shí)處死動(dòng)物,在整體成像系統取淋巴結轉移灶原代培養,接種裸小鼠,重復篩選3次后獲得淋巴結轉移潛能的鼻咽癌細胞株(如5-8F-LN),將其懸液裸鼠爪墊接種0.1ml,20天后可見(jiàn)到裸鼠腘窩可捫及轉移性結節。將篩選得到的細胞懸液(5-8-LN)采用原位注射的方式接種給裸鼠,可建立鼻咽癌原位接種模型,可視化觀(guān)察原位腫瘤的生長(cháng)情況以及血管生成和轉移。

  2.兔鼻咽移植癌模型  將VX2瘤細胞株荷瘤兔麻醉,將腫瘤從兔的荷瘤部位剝離,生理鹽水沖洗,剔除壞死組織后剪碎,勻漿器勻漿,生理鹽水稀釋成1×10000000/ml細胞懸液,注射0.2ml細胞懸液于兔后腿腹股溝皮下,制成傳代兔,2周左右可形成實(shí)質(zhì)性包塊,腫瘤長(cháng)至直徑2cm可繼續傳代。選2~4月齡新西蘭兔,雌雄均可,將兔麻醉后仰臥,張口固定,穿刺針穿過(guò)軟腭進(jìn)入鼻咽部,CT掃描觀(guān)察進(jìn)針位置,滿(mǎn)意后注入瘤細胞懸液0.4ml,3~4周后可發(fā)現鼻咽部腫物,并可發(fā)生多部位的瘤細胞轉移。

  【模型特點(diǎn)】

  1.裸小鼠淋巴結轉移動(dòng)物模型  利用免疫缺陷動(dòng)物體內傳代的方法,篩選出不同器官親和性的瘤細胞亞株,通過(guò)觀(guān)察轉移的特異性和相關(guān)影響因素探討腫瘤轉移的機制。還可利用轉染技術(shù)將穩定表達熒光素酶的腫瘤細胞原位或異位移植到裸鼠,通過(guò)活體熒光成像技術(shù)可視化觀(guān)察鼻咽癌瘤細胞的生長(cháng)、發(fā)展和轉移過(guò)程。

  2.兔鼻咽癌轉移模型  此模型腫瘤形成后向周?chē)杆俳櫺陨L(cháng),頸部淋巴結轉移率高(93.3%),晚期可出現肺轉移,與人鼻咽癌的生長(cháng)過(guò)程類(lèi)似。嚙齒類(lèi)動(dòng)物鼻咽癌模型由于動(dòng)物體積小,鼻咽部更小,不適合進(jìn)行影像學(xué)檢查來(lái)觀(guān)察細微的結構變化。家兔體型相對較大,可以在CT、MRI、 PET-CT影像學(xué)檢查中明顯、清晰地顯示所關(guān)注的鼻咽結構、鼻咽腫物以及周?chē)M織的關(guān)系等。

  【模型評估和應用】腫瘤轉移是惡性腫瘤最重要的生物學(xué)特性之一,研究腫瘤轉移機制和抗腫瘤研究都必須建立相應的人類(lèi)腫瘤動(dòng)物轉移模型。兩種鼻咽癌轉移模型均有轉移率高、相對淋巴結轉移靶向性較強的特點(diǎn),所選用瘤細胞株生物學(xué)特性穩定,建模過(guò)程也相對簡(jiǎn)單易行。家兔轉移模型是一種腫瘤細胞生長(cháng)特性與人鼻咽癌生長(cháng)特性相

  似又可以方便進(jìn)行相關(guān)影像學(xué)檢查的模型,對于研究鼻咽癌轉移機制和鼻咽癌防治的探索是非常方便的手段??梢暬茄拾┺D移模型對進(jìn)行鼻咽癌治療的放化療分割、藥物篩選等研究都具有重要意義。

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