(1)復制方法 體重210~290g雄性Wistar大鼠,按45mg/kg體重的劑量腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉。靜脈注入肝素2mg后開(kāi)胸取出心臟,以70cm H2O(6.86kPa)在恒溫恒壓灌流裝置上灌流。灌流液為富氧含8mol/L葡萄糖的 K—H溶液。用3×6號醫用縫針00號醫用縫線(xiàn)在冠狀動(dòng)脈前降支起始部穿越冠狀動(dòng)脈深處作一待扎縫線(xiàn),打結拉緊該線(xiàn)即可阻斷該支動(dòng)脈。結扎后要解除結扎再灌注者在該縫線(xiàn)與待扎組織間填一直徑約1.5mm的塑料絲。解除結扎時(shí)先拔出該塑料絲,再剪斷結扎線(xiàn)。灌流分三個(gè)階段:①預備灌流期:用含8mM葡萄糖的富氧K—H溶液灌流5min,使心臟達到穩定狀態(tài)。②冠狀動(dòng)脈結扎期:結扎冠狀動(dòng)脈前降支,結扎期限為10、15、30及60min。③恢復灌流期:解除結扎,使原結扎區再獲得含8mM葡萄糖的K—H溶液灌流20min。灌流液流量的測定:收集并測量1min內經(jīng)心臟冠狀血管流出的流量,以ml/min表示。以預灌期的3.5~4.5min時(shí)之流量為基礎流量。結扎期分別取結扎后3.5~4.5min時(shí)之流量為結扎期初流量;以解除結扎前1.5~0.5min時(shí)之流量為結扎期終流量。復灌期分別取結扎解除后3.5~4.5min時(shí)之流量為復灌期初流量,18.5~19.5min時(shí)為復灌期終流量。以基礎流量為100%,其他時(shí)期的流量與其比較為相對流量。灌流結束后,取下心臟,立即在冠狀動(dòng)脈內注入4ml pH 7.4,0.1mol/L磷酸緩沖液配置的6%戊二醛作灌注固定,分別在結扎區和非結扎區取材,作電鏡和光鏡組織切片,進(jìn)行組織學(xué)檢查。
(2)模型特點(diǎn) 離體大鼠心臟冠狀動(dòng)脈結扎缺氧模型可對離體大鼠心臟進(jìn)行不同缺氧時(shí)間和不同缺氧方式的實(shí)驗,結果表明不僅離體大鼠心臟的全心缺氧灌注可以反映出心肌缺氧的一些共同特征,在離體灌流大鼠心臟上結扎其冠狀動(dòng)脈也可造成缺血性心臟病的病理特征。
(3)比較醫學(xué) 本方法制備的模型與在體心臟冠脈結扎一樣均可以復制出心肌缺氧的特征性改變,且心臟的活動(dòng)既沒(méi)有神經(jīng)調節,也沒(méi)有激素等體內其他調節物質(zhì)的參與,實(shí)驗條件單純、易控;同時(shí)同一標本上有缺氧和非缺氧兩個(gè)區域,便于自身對照。但結扎區仍有一定的側支循環(huán)補償是有別于整體缺氧灌流的。