(1)復制方法 雄性成年新西蘭兔,按1.0g/kg體重的劑量經(jīng)兔耳緣靜脈注射20%氨基甲酸乙酯麻醉。動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)臺上,頸部皮膚常規消毒并去毛,作氣管切開(kāi)插入“Y”型玻璃套管,左側頸總動(dòng)脈插管連接檢壓計觀(guān)察記錄血壓,右側股動(dòng)脈插入塑料導管供取血用。用20ml注射器連接20cm塑料導管,將導管插入玻璃套管內,快速向兔肺內灌人海水4ml/kg體重,1min內灌完。模型兔在灌海水前后不同時(shí)期分別由股動(dòng)脈采血測定動(dòng)脈血pH、PO2、 PCO2、血氧飽和度(SO2)、實(shí)際碳酸氫鹽(AB)和堿剩余(BE)等指標;并作血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1a。(6-keto~PGF1a)測定。模型動(dòng)物于灌海水后120min,經(jīng)靜脈過(guò)量注射戊巴比妥鈉麻醉處死,取其兩肺下葉組織,常規固定后作石蠟組織切片及透射電鏡超薄切片,置光鏡及電鏡下觀(guān)察。
(2)模型特點(diǎn) 灌海水后即刻,模型動(dòng)物即出現呼吸困難、鼻翼煽動(dòng),輔助呼吸肌收縮增強,呼吸頻率顯著(zhù)增加;隨后動(dòng)物發(fā)紺明顯,其氣管內不斷溢出泡沫狀液體,兩肺布滿(mǎn)濕J羅音。灌海水后30min,模型動(dòng)物PO2明顯下降,而后可緩慢回升,但始終處于很低水平;PCO2僅在灌海水后10~30min中度升高,在60min后反而低于灌海水前水平;灌海水后30min,模型動(dòng)物動(dòng)脈血漿TXB2和6-keto-PGF1a顯著(zhù)升高,以后雖呈緩慢下降趨勢,但仍處于較高水平。肺病理形態(tài)肉眼觀(guān)察模型動(dòng)物肺表面呈淡紅色,可見(jiàn)暗紅色片狀區和出血區,切面呈暗紅色,擠壓時(shí)有粉紅色水腫液溢出。光鏡下觀(guān)察肺組織內可見(jiàn)局灶性肺泡水腫、肺間質(zhì)水腫、肺不張、肺充血和肺出血等病理變化;未受累的肺泡呈代償性肺氣腫改變。電鏡觀(guān)察可見(jiàn)肺泡Ⅰ型和Ⅱ型上皮細胞受損、胞體腫脹、板層小體多被破壞或有排空現象;毛細血管內皮細胞腫脹,細胞膜明顯受損,血管基底膜暴露,管腔內有血小板聚集和附壁現象。
(3)比較醫學(xué) 在航海醫學(xué)中,海水淹溺屢有發(fā)生,且淹溺者一旦發(fā)生肺水腫,則病情危重、發(fā)展迅速、死亡率較高。建立理想的海水淹溺肺水腫(pulmonary edema after seawater drowning,PE-SWD)動(dòng)物模型用于實(shí)驗研究十分必要。本模型通過(guò)向兔肺內灌入一定量海水,動(dòng)物可出現明顯的呼吸困難,呼吸頻率顯著(zhù)增加,兩肺布滿(mǎn)濕啰音,氣管內不斷溢出泡沫狀液體,PO2和SO2顯著(zhù)下降,發(fā)紺明顯,表現出嚴重的、進(jìn)行性的低氧血癥;模型動(dòng)物動(dòng)脈血中pH、AB和 BE降低,酸中毒持續存在,血壓處于較低水平;肺表面可見(jiàn)暗紅色片狀區和(或)出血區,切面可擠出多量的粉紅色水腫液。這些臨床病理變化,符合PE-SWD的診斷標準。采用本方法復制的PE-SWD動(dòng)物模型,制作方法簡(jiǎn)便,重復性好,疾病特征典型,評價(jià)指標穩定可靠,與臨床所見(jiàn)PE- SWD極為相似,適用于臨床上PE-SWD的發(fā)生機制、病理生理變化和搶救治療方面的研究。