血管性癡呆的病因是由于腦血管硬化、狹窄而導致腦部供血不足，久而久之使腦細胞功能減退、喪失而引起的記憶功能衰退，認知障礙等。動(dòng)物模型主要是造成腦部供血不足，從而引起繼發(fā)性的記憶障礙。常采用全腦缺血的動(dòng)物模型來(lái)模擬人類(lèi)的血管性癡呆。

　　一、 雙側頸總動(dòng)脈阻斷模型(Model of occlusion of bilaterial carotis communis artery)

　　(1)復制方法  雄性大鼠，體重為250～300g。以水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊巴比妥鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉后仰臥位，剃除頸部毛發(fā)，手術(shù)區域皮膚消毒。頸部正中切口，鈍性分離雙側頸總動(dòng)脈，用1號線(xiàn)將其行永久性結扎?？p合切口后再行局部消毒，小心放回籠內(每籠一只待其完全清醒)。局部傷口縫合前，可用慶大霉素3～5滴滴入局部傷口內防止感染。術(shù)后正常飼養12周，自第13周起可開(kāi)始分組給藥治療。行為學(xué)檢驗可采用穿梭箱法和Morris水迷宮分析系統，進(jìn)行定位航行實(shí)驗和空間探索試驗。

　　(2)模型特點(diǎn)  術(shù)后的1～3周，陸續有動(dòng)物死亡發(fā)生，其死亡率在20％～40％，因此需根據實(shí)驗情況增加手術(shù)動(dòng)物的總數。

　　(3)比較醫學(xué)  該模型由于阻斷了雙側頸總動(dòng)脈，造成了腦部急性供血不足，隨后可通過(guò)基底動(dòng)脈和基底動(dòng)脈環(huán)血流調節以及逐漸形成的側支循環(huán)所改善，但海馬區達不到正常腦供血水平，形成慢性大腦供血不足，模擬了人類(lèi)由于血管粥樣硬化使頭頸動(dòng)脈逐漸狹窄所致的慢性大腦供血不足。水迷宮實(shí)驗顯示，動(dòng)物的定位航行和空間探索能力均降低，癡呆率達80％左右。該模型可用于研究癡呆腦組織的形態(tài)及病理生理變化機制，也可用于判定某些治療手段和藥物的效果。

　　二、 雙側頸總動(dòng)脈、椎動(dòng)脈阻斷模型(Model of occlusion of bilaterial carotis communis artery with vertebral artery)

　　(1)復制方法  雄性大鼠，體重為300～350g。以水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊巴比妥鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉后俯臥位固定于立體定位儀上，剃除頸部毛發(fā)，手術(shù)區域皮膚消毒。行背側頸部正中切口，逐層鈍性分離暴露雙側第1頸椎橫突小孔，用直徑0.5mm的電凝針燒灼雙側翼小孔內的椎動(dòng)脈，造成永久性閉塞。再將大鼠仰臥位固定，行腹側頸正中切口，鈍性分離雙側頸總動(dòng)脈，以4號線(xiàn)穿線(xiàn)備用。24h后乙醚麻醉，用微動(dòng)脈夾夾閉雙側頸總動(dòng)脈5min，間隔1h后再夾閉5min，共夾閉3次。術(shù)后連續5d經(jīng)肌肉注射慶大霉素，每只2萬(wàn)U/d。

　　(2)模型特點(diǎn)  雙側頸總動(dòng)脈夾閉后1min，大鼠翻正反射消失，意識喪失，再通1h后意識逐漸恢復，翻正反射出現。動(dòng)物造模2周后其主動(dòng)回避反應明顯下降，海馬腦片上 LTP降低，細胞的超微結構改變明顯。行為學(xué)檢查可采用穿梭箱法和Morris水迷宮法。術(shù)后也有動(dòng)物死亡發(fā)生，因此要根據實(shí)驗情況增加手術(shù)動(dòng)物的總數，若出現肢體運動(dòng)障礙的大鼠應予以剔除。

　　(3)比較醫學(xué)  反復缺血再灌注和長(cháng)期慢性低灌流是血管性癡呆的重要原因。該模型通過(guò)燒灼永久性閉塞了雙側椎動(dòng)脈，造成長(cháng)期慢性腦灌注不足；反復夾閉雙側頸總動(dòng)脈造成動(dòng)物腦組織的反復缺血再灌注，與臨床VD的發(fā)病類(lèi)似。此模型是目前國際公認的VD造模方法。它較好地模擬了VD的發(fā)病特點(diǎn)，且缺血后生理指標較穩定，病理改變較為充分明確，卒中指數低，無(wú)明顯肢體運動(dòng)障礙。

　　三、 多發(fā)性腦梗死性癡呆(DMI)動(dòng)物模型(Model of dementia of multi-infarction in brain)

　　(1)復制方法  SD大鼠，雌雄不拘，體重為350～450g(10月齡以上)的老齡鼠。

　　1)模型制備  用以水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊巴比妥鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉，剃除頸部毛發(fā)，手術(shù)區域皮膚消毒。頸正中切開(kāi)皮膚，分離肌肉，暴露左側頸總動(dòng)脈及頸內、外動(dòng)脈。用動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉頸總動(dòng)脈，從頸外動(dòng)脈處逆行穿刺插管注入0.2～0.4ml栓塞液(取SD大鼠無(wú)菌自然干燥的血凝塊，研碎分級過(guò)篩，選直徑100～200目的微粒溶于生理鹽水中，制成200g/L的懸濁液，即栓塞液)，結扎頸外動(dòng)脈。然后開(kāi)放頸總動(dòng)脈夾，使栓子通過(guò)頸內動(dòng)脈進(jìn)入顱內至大腦各動(dòng)脈，造成多灶性腦梗死。局部傷口縫合前，術(shù)后連續5d肌肉注射慶大霉素，每只2萬(wàn)U/d。

　　雙側多發(fā)性梗死性癡呆模型制作時(shí)，兩側頸外動(dòng)脈同時(shí)注入栓塞液，方法劑量同上。

　　2)檢測指標

　?、傩袨閷W(xué)癥狀  術(shù)后24h觀(guān)察動(dòng)物的活動(dòng)并進(jìn)行神經(jīng)分級。0級：動(dòng)物肢體活動(dòng)無(wú)明顯障礙；1級：提起鼠尾頭垂向患側，前肢下垂；2級：動(dòng)物行走出現追尾現象；3級：動(dòng)物行走障礙。

　?、趯W(xué)習記憶障礙測試  采用穿梭箱法和Morris水迷宮法對動(dòng)物的記憶功能進(jìn)行檢測。

　?、鄄±順吮局谱?  分別于第10日、20日測定后處死動(dòng)物。一半動(dòng)物取腦標本做成腦切片，用三苯四唑(TTC)染色，觀(guān)察梗塞面積及病理變化。另一半動(dòng)物取腦標本固定于10％甲醛液內，作3個(gè)冠狀切面，同時(shí)取小腦、中腦、橋腦、延髓制成切片，HE染色光學(xué)顯微鏡下檢查。

　　(2)模型特點(diǎn)  單側栓塞動(dòng)物手術(shù)后的死亡率在20％～25％，雙側栓塞動(dòng)物術(shù)后的死亡率高達40％～50％。動(dòng)物麻醉清醒后能站立，但大多數有不同程度的跛行(尤以后肢明顯)；病理學(xué)檢測發(fā)現，注入的微球大部分集中在手術(shù)同側腦半球，少數在異側，梗死區多分布在同側大腦中動(dòng)脈和前動(dòng)脈區，少數分布在異側前動(dòng)脈區。TTC染色見(jiàn)，正常腦組織呈深橙紅色，腦缺血區不著(zhù)色或著(zhù)色淺。單側多發(fā)性腦梗死鼠腦內病灶為3～5個(gè)。雙側腦栓塞腦內病灶可達6～8個(gè)；顯微鏡檢查可見(jiàn)，栓死區軟腦膜及腦血管充血擴張，血管周?chē)g隙增寬，腦內紅細胞堆積，神經(jīng)細胞呈局部缺血性改變，胞體不同程度的縮小，核固縮呈三角形或桿狀。梗死灶中常見(jiàn)單核細胞、巨噬細胞、膠質(zhì)細胞增生和纖維蛋白聚集。海馬區AChE陽(yáng)性神經(jīng)元數量明顯減少。

　　(3)比較醫學(xué)  與大腦中動(dòng)脈局灶性腦缺血、雙側頸總動(dòng)脈結扎致前腦缺血、四血管閉塞致全腦缺血等模型相比， DMI模型較好地模擬了臨床DMI的行為癥狀和病理形態(tài)學(xué)改變，更接近于人類(lèi)自然栓塞現象。且已被證實(shí)該法造模與人類(lèi)VD的病因病理基本相似。DMI模型大鼠可出現明顯的學(xué)習記憶障礙，造模成功率高，手術(shù)創(chuàng )傷小，是迄今為止用來(lái)評價(jià)抗VD藥物作用及探討藥物作用機制較為常用的動(dòng)物模型。DMI模型亦存在著(zhù)諸多不足：①DMI模型大鼠存活時(shí)間較短，最長(cháng)也未能超過(guò)30d，與臨床病程相差甚遠。②翼突腭動(dòng)脈是頸內動(dòng)脈的分支，故在造模過(guò)程中，栓子進(jìn)入頸內動(dòng)脈的同時(shí)，也會(huì )流入翼突腭動(dòng)脈，導致顱外梗塞。③術(shù)后結扎了頸外動(dòng)脈，阻斷了部分腦血供。④頸外動(dòng)脈較細，壓力高，注入栓子困難，進(jìn)針時(shí)易刺穿甚至挑斷血管，造成血液外流。盡管如此，截至目前，DMI動(dòng)物模型仍不失為一個(gè)常用的較好VD模型。

　　四、 小鼠反復腦缺血再灌注模型(Ischemia and reperfusion in mice)

　　(1)復制方法  雌性、雄性小鼠皆可，體重為25～30g。術(shù)前10h禁食不禁水。小鼠經(jīng)腹腔注射烏拉坦(按1.0g/kg體重的劑量)或戊巴比妥鈉(按60mg/kg體重的劑量)使其麻醉，待翻正反射消失后，仰位固定。頸部皮膚消毒，行正中切口，鈍性分離雙側頸總動(dòng)脈，38℃下行10min夾閉、20min再通，如此反復3次，并使動(dòng)物失血5％～10％的血容量。術(shù)中注意頸部創(chuàng )面點(diǎn)滴2～3滴(2.50×10000U/kg體重)慶大霉素。術(shù)后24h、48h進(jìn)行學(xué)習、記憶的行為學(xué)檢測。手術(shù)期間注意給動(dòng)物保溫。

　　(2)模型特點(diǎn)與比較醫學(xué)  術(shù)后3～30d神經(jīng)病理學(xué)與行為學(xué)動(dòng)態(tài)觀(guān)察發(fā)現，模型小鼠的大腦皮質(zhì)變薄，額葉皮質(zhì)錐體細胞核固縮，局限性神經(jīng)元數目減少，膠質(zhì)細胞增生，形成多處結節。海馬CA1區細胞缺失和排列不規則，且隨時(shí)間推移逐漸加重，至術(shù)后30d，海馬CA1區細胞幾乎完全脫失，膠質(zhì)細胞大量增生，CA2、CA3區細胞也嚴重脫失，呈現海馬硬化。與此同時(shí)模型小鼠表現出顯著(zhù)的缺血性學(xué)習記憶障礙。該模型的優(yōu)勢在于其方法簡(jiǎn)便可靠，且小鼠價(jià)廉，適合于藥物的初篩。