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驚厥動(dòng)物模型

  (一)戊四氮致驚厥模型

  1.造模材料  動(dòng)物:昆明種小鼠,體重18~22g,雌雄兼用,或大鼠;藥物:戊四氮(pentetrazole, PTZ)。

  2.造模方法  造模組小鼠腹腔注射戊四氮90mg/kg。對照組等量注射生理鹽水?;虼笫蠹茸⑸湮焖牡?12mg/kg,或皮下注射110mg/kg,以全身陣攣性驚厥為指標,一般給戊四氮后觀(guān)察60min。

  3.造模原理  戊四氮主要作用于腦干及大腦,使興奮性突觸的易化過(guò)程增強而引起驚厥發(fā)作。在閾劑量時(shí),能使動(dòng)物發(fā)生陣攣性抽搐,是常用的致驚厥劑。

  4.造模后的變化  以后肢伸直為指標,可觀(guān)察到小鼠發(fā)生驚厥(大發(fā)作),陣攣潛伏期為(17.3±7.6)s。

  5.注意事項  本實(shí)驗與動(dòng)物品系有關(guān),不同種系小鼠持續驚厥后死亡發(fā)生率差異較大,實(shí)驗時(shí)應予注意;部分動(dòng)物在陣攣性驚厥后,可發(fā)生強直性驚厥以至死亡。

  (二)戊四氮慢性點(diǎn)燃大鼠驚厥模型

  1.造模材料  動(dòng)物:SD雄性大鼠,體重(200±20)g;藥物:戊四氮。

  2.造模方法  SD雄性大鼠,體重(200±20)g,隔天一次腹腔注射PTZ 35mg/kg,持續28天,停藥1周后,用相同劑量PTZ測試。

  3.造模原理  戊四氮興奮腦干嘴側區及大腦導致動(dòng)物驚厥。

  4.造模后的變化  造模后,凡顯示連續5次2級以上驚厥的大鼠為點(diǎn)燃大鼠。大鼠驚厥行為評分標準:0級,沒(méi)有行為上的發(fā)作;1級,節律性點(diǎn)頭或頭部顫搐;2級,陣攣性咀嚼;3級,頭部顫搐加前肢陣攣性抽搐;4級,袋鼠姿勢(上身直立);5級,跌倒;6級,強直性驚厥。

  (三)士的寧致小鼠驚厥模型

  1.造模材料  動(dòng)物:昆明種小鼠,體重18~22g,雌雄兼用;藥物:硝酸士的寧注射液。

  2.造模方法  造模組小鼠腹腔注射硝酸士的寧注射液1.5mg/kg。對照組注射等量生理鹽水。

  3.造模原理  士的寧是脊髓抑制性神經(jīng)元甘氨酸受體的拮抗劑,可選擇性的興奮脊髓,大劑量腹腔注射使動(dòng)物產(chǎn)生癲癇樣強直性驚厥。

  4.造模后的變化  造模后可觀(guān)察到小鼠發(fā)生強直性驚厥,潛伏期(5.1±1.0)min,驚厥率100%,死亡時(shí)間(6.8±2.6)min,死亡率100%。

  (四)電刺激導致小鼠驚厥模型

  1.造模材料  動(dòng)物:昆明種小鼠,體重18~22g,雌雄兼用;器械:YSD-5型藥理、生理實(shí)驗多用儀。

  2.造模方法  取小鼠用YSD-5型藥理生理實(shí)驗多用儀進(jìn)行電刺激。刺激方式:?jiǎn)未?;間隔:300ms;電壓調節旋鈕固定在7.5格(100V)。以后肢發(fā)生強直性驚厥為合格。

  3.造模原理  電刺激導致小鼠驚厥。

  4.造模后的變化  電刺激后動(dòng)物發(fā)生強直性驚厥。

  (五)發(fā)育期大鼠高熱驚厥模型

  1.造模材料  動(dòng)物:21天齡SD大鼠,體重60~100g,雌雄兼用;器械:熱水浴。

  2.造模方法  熱水浴箱內(44.5℃)的水深以大鼠沿箱壁站立時(shí)僅露出頭部為準,大鼠在水中5min如不驚厥則取出,5min內發(fā)生驚厥者則驚厥開(kāi)始時(shí)即取出。隔日誘導驚厥1次,共誘導10次,末次誘導后24h處死大鼠。

  3.造模原理  采用熱水浴誘導大鼠高熱驚厥。

  4.造模后的變化  HE染色結果:正常對照組大鼠海馬CA1區、CA2區細胞排列整齊、極向好、染色均勻,細胞核大小一致、長(cháng)橢圓形。造模組大鼠海馬CA1區、CA2區細胞排列紊亂、極向不清、細胞空泡變,細胞核大小不一致、呈圓形或橢圓形。

  大鼠海馬CA1區及門(mén)區神經(jīng)元超微結構改變:正常對照組大鼠海馬CA1區及門(mén)區神經(jīng)元細胞規則,基質(zhì)均勻,線(xiàn)粒體呈橢圓形,大小正常,嵴規則,粗面內質(zhì)網(wǎng)及核糖體結構清楚,核膜平滑,核圓形,常染色體分布均勻,核仁清楚。造模組大鼠海馬CA1區及門(mén)區神經(jīng)元線(xiàn)粒體體積小,基質(zhì)濃縮,嵴模糊不清,甚至消失,有的線(xiàn)粒體出現空泡、畸形,高爾基復合體輕中度擴張,結構不清。

  (六)聽(tīng)源性致驚厥模型

  1.造模材料  動(dòng)物:大鼠,雌雄兼用;器械:隔音箱,電鈴。

  2.造模方法  選用聽(tīng)源性發(fā)作敏感的大鼠,以電鈴刺激60s(或90s)能產(chǎn)生奔跑或驚厥者為實(shí)驗對象。以后每天以相同條件刺激一次,連續3~5天,反應恒定者作為模型用于實(shí)驗。

  3.造模原理  強烈的鈴聲刺激,造成聽(tīng)覺(jué)中樞過(guò)度興奮,而后擴散到鄰近的運動(dòng)中樞,使某些敏感動(dòng)物產(chǎn)生一種定型的運動(dòng)性發(fā)作。

  4.造模后的變化  電鈴刺激時(shí)動(dòng)物出現驚厥。

  5.注意事項  實(shí)驗前應對試驗大鼠對鈴聲的反應性進(jìn)行篩選,實(shí)驗條件必須嚴格控制,每次刺激控制條件應一致。

  (七)氨基脲致小鼠驚厥模型

  1.造模材料  動(dòng)物:昆明種小鼠,體重(22±2)g,雌雄兼用;藥物:氨基脲。

  2.造模方法  將氨基脲150mg/kg尾靜脈注射,注射容積0.01ml/g,注射時(shí)間8s。以出現狂奔和后肢強直為驚厥發(fā)作。

  3.造模原理  硫代氨基脲是谷氨酸脫羧酶抑制劑,抑制谷氨酸生成γ-氨基丁酸(gam-ma-aminobutyric acid, GABA),使GABA合成減少,腦內GABA水平下降可引起驚厥。

  4.造模后的變化  注射后,造模動(dòng)物出現狂奔和后肢強直,潛伏期為(49.3±11.6) min,存活時(shí)間為(59.3±23.4)min。

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