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急性胰腺炎實(shí)驗動(dòng)物模型制備

  胰腺炎動(dòng)物模型是研究胰腺炎發(fā)病機制及探討臨床治療的最好的方法,但是由于不同類(lèi)型的胰腺炎間其發(fā)病機制不同,對胰腺炎的發(fā)病機制還不清楚,所以沒(méi)有一種很好的動(dòng)物模型可以模擬人的胰腺炎。但自1856年Busnar-do等以膽汁和橄欖油混合液注射犬胰管,成功地誘導急性胰腺炎模型以來(lái),經(jīng)過(guò)一個(gè)多世紀的探討,胰腺炎動(dòng)物模型的制備方法主要有以下幾種:

     1.?;悄懰徕c造模

  1)模型建立方法:大鼠于術(shù)前12h禁食,自由飲水,戊巴比妥溶液2mg/100g體質(zhì)量行腹腔內麻醉,固定。經(jīng)上腹正中切口入腹,提起十二指腸以小號血管夾分別夾住十二指腸段和肝門(mén)部胰膽管。TB針(4.5針頭,1ml注射器)穿刺胰膽管(最好用微泵注射),注射5%C?;悄懰徕c(0.1ml/100g),持續1min,停留5min,然后拔除針頭,去除血管夾??捎^(guān)察大鼠胰腺組織明顯水腫、出血,縫合腹壁各層。

  2)模型的特點(diǎn)和功用:此法是急性壞死性胰腺炎(ANP)較成熟的模型。

  3)模型建立和使用注意事項:24h的存活率為50%左右

     2.蛙皮素造模

  1)模型建立方法:大鼠于術(shù)前12h禁食,自由飲水,蛙皮素(25μg/kg)腹腔注射,注射后5h形成水腫性急性胰腺炎(CIP)

  2)模型的特點(diǎn)和功用:此法是水腫性急性胰腺炎模型,程度較輕.

  3)模型建立和使用注意事項:現在國內以研究ANP為主,使用此模型請注意研究?jì)热?

     3.逆行膽管注射法

  結扎胰膽管,行主胰管套管插管,經(jīng)主胰管注入可激活胰酶的物質(zhì)或胰酶,如脫氧膽酸鈉、自體膽汁等。胰酶注入胰管產(chǎn)生急性胰腺炎,如與PGE2同時(shí)灌注則產(chǎn)生急性壞死性胰腺炎。Schmidt等用低量胰管灌注糖脫氧膽酸結合靜脈注射蛙皮素制成大鼠急性胰腺炎模型,可產(chǎn)生腺胞中度壞死的均勻損傷,適用于對胰腺炎的研究.

     4.胰管膽結扎法

  結扎進(jìn)入十二指腸處胰膽管或單純結扎胰管,Lerch等在壺腹部結扎胰膽管,結扎后6h出現水腫性胰腺炎,12h后出現出血、壞死、炎性細胞浸潤。該模型的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單且避免了藥物引起非特異性系統影響,與人體膽汁返流性胰腺炎相類(lèi)似,但有時(shí)只產(chǎn)生輕度胰腺炎。Runzi等對此方法進(jìn)行了改進(jìn),把十二指腸的近端10cm離斷后兩端閉合結扎膽總管,胃與十二指腸吻合,使胰液流入閉袢,隨其內壓增加而發(fā)生逆流,形成急性壞死性胰腺炎,術(shù)后4h發(fā)生水腫性胰腺炎,9~12h有出血壞死。另外,還有用胰管結扎加胰動(dòng)脈或靜脈阻斷產(chǎn)生急性胰腺炎.

     5.飼養法

  膽堿乙硫氨酸飼養雌性大鼠制成急性胰腺炎模型,而雄性大鼠對藥物刺激不敏感。用無(wú)膽堿乙硫氨酸飼養幼鼠,4d后均發(fā)生了胰腺壞死及腹腔脂肪壞死。原理可能是無(wú)膽堿乙硫氨酸致胰腺腺泡分泌作用受阻,酶原顆粒和溶酶體在細胞內激活.

     6.促分泌法

  用蛙皮素類(lèi)似物CCK-PZ靜脈或皮下注射,使胰腺蛋白水解酶分泌大量增加達到能引起胰腺腺泡自溶的水平.

     7.離體胰腺炎模型

  主要采用孤立體外灌注技術(shù),游離胰腺及十二指腸,行脾動(dòng)脈、腸系膜動(dòng)脈、門(mén)靜脈和胰管插管;然后取下胰腺,連接能控制溫濕度的氧和灌注循環(huán)器;穩定灌注30min后,從動(dòng)脈灌注游離脂肪酸模擬酒精性胰腺炎;阻塞胰管并靜脈注射蛙皮素產(chǎn)生膽源性胰腺炎;使缺血2 h產(chǎn)生缺血性胰腺炎.

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