目的：構建猴D型逆轉錄病毒p27蛋白，建立流式免疫熒光微球檢測技術(shù)，以檢測猴D型逆轉錄病毒。

　　方法：通過(guò)PCR擴增p27基因片段，與pGEX-4T-1表達載體連接，轉化成BL21（DE3）并表達。 SDS-PAGE分析蛋白質(zhì)表達的形態(tài)和最佳誘導時(shí)間。 GST樹(shù)脂用于純化目標蛋白，用磁珠包被，并建立用于臨床樣品檢測的流式免疫熒光微球檢測技術(shù)。

　　結果：重組蛋白在可溶性上清液中表達，最佳誘導時(shí)間為4小時(shí)。涂覆磁珠后，我們成功建立了流式免疫熒光微球檢測技術(shù)。稀釋81倍后仍可將陽(yáng)性血清檢測為陽(yáng)性。它不會(huì )與其他猴子病原體的陽(yáng)性血清發(fā)生交叉反應，并且具有很強的特異性。 它可以與ELISA方法同時(shí)使用。測試了二十四個(gè)臨床樣品。其中三個(gè)樣品的流動(dòng)免疫熒光微球檢測結果為陽(yáng)性，ELISA檢測結果為兩個(gè)陽(yáng)性，其中一個(gè)為陰性。兩種方法的檢出率為96％。

　　結論：成功地表達了猴D逆轉錄病毒p27蛋白，并利用該蛋白建立了高靈敏度，高特異性，低樣品需求量的流式免疫熒光微球檢測技術(shù)，并隨后用于多流，用于推廣和應用。熒光抗體法微球檢測技術(shù)奠定了基礎。