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轉基因小鼠常見(jiàn)傳染病血清學(xué)液相芯片技術(shù)多重檢測方法的建立-【動(dòng)物實(shí)驗外包服務(wù)】

  目的:制備小鼠MHV,LCM,ECT和HANT液相芯片,建立轉基因小鼠傳染病抗體的xMAP多重檢測方法。

  方法:將熒光微球分別與小鼠MHV,LCM,ECT和HANT蛋白質(zhì)偶聯(lián),以?xún)?yōu)化最佳蛋白質(zhì)偶聯(lián)量,檢測抗體的最佳工作濃度和鏈霉親和素-PE的最佳工作濃度。準備鼠標MHV。對LCM,ECT和HANT液相血清以及56種轉基因小鼠血清樣品,陰性血清,陽(yáng)性血清和質(zhì)量控制血清進(jìn)行xMAP多重檢測。它還使用傳統的ELISA方法檢查xMAP測試的結果。

  結果:1)小鼠MHV,LCM,ECT和HANT蛋白的最佳偶聯(lián)量分別為20μg,20μg,40μg和20μg,檢測到的抗體的最佳濃度為2μg/ mL分別為2μg/ mL和2μg/ mL,分別為4μg/ mL;鏈霉親和素-PE抗體的最佳濃度為2μg/ mL;(2)xMAP測試結果為No。 14、23、55和56個(gè)轉基因小鼠的血清MHVMFI和指數值較高。對于質(zhì)控血清,其余小鼠血清的MFI和指數值均比質(zhì)控血清低,并且是轉基因小鼠。 23號,55號和56號是MHV陽(yáng)性??贵w和其余小鼠均具有MHV,LCM,ECT和HANT抗體。陰性;(3)ELISA檢測結果顯示MHVA450和No.14、No.23、No.55和No.56轉基因的指標值,所有小鼠均高于質(zhì)控血清,但其余所有小鼠血清A450和指標值低于質(zhì)量控制血清。關(guān)于血清管理,轉基因小鼠No.14、No.23、No.55和No.56對MHV抗體呈陽(yáng)性,而其余小鼠對MHV,LCM,ECT和HANT抗體呈陰性。 ELISA測試的結果與xMAP測試的結果一致。結論結論:建立的xMAP多重檢測技術(shù)可用于檢測轉基因小鼠的傳染病。

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