Il-8是一種分子量為8~10kD的多肽,對嗜中性粒細胞,T淋巴細胞、嗜鹼性粒細胞具有趨化作用,并可激活嗜中性粒細胞,是一種重要的炎癥介質(zhì)。在嚴重感染病人的血清中、炎癥局部滲出液中都可檢測到高水平的IL-8。
一、實(shí)驗方法:夾心法ELISA
二、實(shí)驗原理:采用兩株識別不同表位的抗IL-8單克隆抗體,其中一株(4D7)作為包被抗體,以識別和結合待檢標本中的IL-8,另一株作為酶標抗體,與結合于包被抗體的IL-8的另一個(gè)表位結合并催化底物顯色。
三、實(shí)驗材料:抗體、標準品、ABTS
四、試劑、試劑盒:緩沖液、PBS
五、儀器、耗材:ELISA板
六、實(shí)驗步驟:
1. 包被
pH9.5 碳酸鹽緩液稀釋4D7單克隆抗體粗提γ球蛋白至1 μg/ml,加入96孔板,100 μl/孔,放4 ℃,36 小時(shí)。