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免疫共沉淀(四)

免疫共沉淀(四)

具體步驟:

  8. 4℃,14000g 離心15min,將上清轉移到一個(gè)新的離心管中。

  9. 測定蛋白濃度,可選用Bradford法做蛋白標準曲線(xiàn)。

  10. 蛋白定量,分裝,-20℃保存,可保存1個(gè)月。

  11. PBS液將總蛋白稀釋至約1ug/ml。

  12. 加入500ul稀釋好的兔抗到總蛋白中。

  13. 于搖床上4℃緩慢搖動(dòng)抗原抗體混合物,可選擇過(guò)夜或室溫放置2h。

  14. 加入100ul Protein A瓊脂糖珠用以捕捉抗原抗體復合物,搖床4℃緩慢搖動(dòng)抗原抗體混合物過(guò)夜或者室溫孵育1h。

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